在TSZ elisa試劑盒操作過程中總是會呈現(xiàn)或大或小的問題，比如說花板、假陽性、全顯色、信號值比空白還低等等。今日上海莼試為咱們帶來了一些實驗經(jīng)驗總結(jié)，教您這樣操作ELISA試劑盒實驗不會失利。
1.有的包被原可能不是蛋白，關(guān)于*和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)咱們要事前對其改造再加以包被，我把辦法簡明的列出如下：
2.親和素*：先親和素先包被載體，參加*化的DNA，這種包被辦法均勻、結(jié)實，已擴展應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。
3.應(yīng)留心以下原理：由于蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是經(jīng)過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團與固相載體外表的疏水基團間 的作用，這種物理吸附長短特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點、濃度等的影響，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團，故更易 吸附到固相載體外表。包被液的挑選，一般挑選ph9.6的碳酸鹽緩沖液。但有時由于實驗的需求，包被原的特殊性也可能選用中性的緩沖溶液來包。 具體的實驗還要有堅固的理論外也要實踐，看一下可不能夠應(yīng)用到自己實驗當(dāng)中去。常用的包被液除了剛才提到的pH9.6碳酸鹽緩沖液，還有 pH7.2的磷酸鹽緩沖液和pH7-8的Tris-HCL緩沖液等等。
4.在洗板時會有必定誤差，人為因素很大(當(dāng)然有條件的用洗板機在外)，洗的不*或串了孔，對如斯敏捷的ELISA體系但是不小的影響。由于 聚苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，為到達別離游離的和結(jié)合的酶符號物的意圖，鏟除殘留在板孔中游離的物質(zhì)，以及非特異性地吸附的干 擾物質(zhì)，在洗刷時又應(yīng)把這種非特異性吸附的攪擾物質(zhì)洗刷下來。洗刷板：能夠說在ELISA操作中，洗刷是zui首要的紐帶技能。