公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供人胚肺成纖維細(xì)胞;HFL1說明書的報價,咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
細(xì)胞名稱:人胚肺成纖維細(xì)胞;HFL1說明書
細(xì)胞形態(tài): 細(xì)胞株
生長特性:貼壁 懸浮 半貼壁
傳代時間:2-3天 3-5天
傳代比例:1:2~1:3 1:1~1:2
儲存:液氮
保存與運(yùn)輸: 干冰常溫運(yùn)輸
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后,已基本上飽和,為使細(xì)胞能繼續(xù)生長,同時
也將細(xì)胞數(shù)量擴(kuò)大,就必須進(jìn)行傳代(再培養(yǎng))。 傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過程。懸浮型細(xì)胞直接分瓶就可以,而貼壁細(xì)胞需經(jīng)消化后才能分瓶。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細(xì)胞活力狀態(tài)良好的細(xì)胞株1420株,其中絕大部分是近年來從美國ATCC和NIH分批引進(jìn)的細(xì)胞種子,少部分來自全國各地細(xì)胞研究所,細(xì)胞來源可靠,背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好
傳代方法:細(xì)胞*匯合時,倒掉舊液,加入消化液(0.25%*+0.03%EDTA)2ml消化,顯微鏡下觀察細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個細(xì)胞后棄掉*,加培養(yǎng)基混勻分瓶,T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml,T75瓶加培養(yǎng)基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培養(yǎng)。
培養(yǎng)是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究zui常用的手段之一,可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。由于細(xì)胞剛剛從活體組織分離出來,故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細(xì)胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段,同時也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。利用此方法還可直接服務(wù)于臨床實(shí)踐
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。ALOX15B Protein Human 重組人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
GABARAPL2 Protein Human 重組人 GATE-16 / GABARAPL2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
DCXR Protein Human 重組人 DCXR / HCR2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CRIP2 Protein Human 重組人 CRIP2 蛋白
SRI Protein Human 重組人 SRI / Sorcin 蛋白
ERH Protein Human 重組人 ERH / DROER 蛋白 (His 標(biāo)簽)
SRFBP1 Protein Human 重組人 SRFBP1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
CKB Protein Human 重組人 CKB / Creatine kinase B type 蛋白 (His 標(biāo)簽)
FGFR1OP Protein Human 重組人 FGFR1OP / FOP 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
PLEK Protein Human 重組人 Pleckstrin / PLEK / p47 蛋白 (His 標(biāo)簽)
PTS Protein Human 重組人 PTS / PTPS 蛋白 (His 標(biāo)簽)
SMNDC1 Protein Human 重組人 SMNDC1 / SPF30 蛋白 (His 標(biāo)簽)
GSTK1 Protein Human 重組人 GSTK1 蛋白
CPNE1 Protein Human 重組人 CPNE1 / Copine I / CPN1 蛋白
AARSD1 Protein Human 重組人 AARSD1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ENO3 Protein Human 重組人 ENO3 / beta-enolase 蛋白 (His 標(biāo)簽)
GOT1 Protein Human 重組人 GOT1 / Aspartate aminotransferase 蛋白 (His 標(biāo)簽)
PFDN4 Protein Human 重組人 PFDN4 / PFD4 蛋白 (His 標(biāo)簽)
NDRG1 Protein Human 重組人 NDRG1 / CAP43 蛋白 (His 標(biāo)簽)
MOB1B Protein Human 重組人 MOBKL1A / MOB1B 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
SAE1 Protein Human 重組人 SAE1 蛋白
UBASH3B Protein Human 重組人 UBASH3B / Sts1 / TULA-2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
UBASH3A Protein Human 重組人 UBASH3A 蛋白 (aa 354-623, His 標(biāo)簽)
CASQ1 Protein Human 重組人 Calsequestrin-1 / CASQ1 蛋白
DNAJC30 Protein Human 重組人 DNAJC30 蛋白 (His 標(biāo)簽)
SRGN Protein Human 重組人 Serglycin / SRGN 蛋白 (His 標(biāo)簽)
NCKIPSD Protein Human 重組人 NCKIPSD / SPIN90 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
BMF Protein Human 重組人 BMF / Bcl2 modifying factor 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ALDH4A1 Protein Human 重組人 ALDH4A1 蛋白
KEAP1 Protein Human 重組人 KEAP1 / INRF2 蛋白
HDAC4 Protein Human 重組人 HDAC4 蛋白 (aa 612-1084)
DCLK1 Protein Human 重組人 DCAMKL1 / DCLK1 蛋白
VRK1 Protein Human 重組人 VRK1 蛋白
RHEB Protein Human 重組人 RHEB 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CCNE1 Protein Human 重組人 CCNE1 / Cyclin-E1 蛋白
APOA1 Protein Human 重組人 APOA1 / ApoAI 蛋白 (His 標(biāo)簽)
MAP2K6 Protein Human 重組人 MKK6 / MEK6 / MAP2K6 蛋白 (207 Asp, 211 Asp)
MAP2K6 Protein Human 重組人 MKK6 / MEK6 / MAP2K6 蛋白
SLPI Protein Human 重組人 SLPI 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HMGB1 Protein Human 重組人 HMGB1 / HMG1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IL1R1 Protein Human 重組人 IL1R1 / CD121a 蛋白
MAPT Protein Human 重組人 MAPT / Tau 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ACBD7 Protein Human 重組人 ACBD7 蛋白 (His 標(biāo)簽)
TNFAIP8 Protein Human 重組人 TNFAIP8 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ABHD10 Protein Human 重組人 ABHD10 蛋白 (aa 53-306, His 標(biāo)簽)
PPIL2 Protein Human 重組人 PPIL2 蛋白 (aa 280-457, His 標(biāo)簽)
GGCT Protein Human 重組人 GGCT 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ENSA Protein Human 重組人 ENSA / Endosulfine alpha 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ROR1 Protein Human 重組人 ROR1 蛋白 (aa 453-783, His & GST 標(biāo)簽)
TMEM25 Protein Human 重組人 TMEM25 蛋白 (His 標(biāo)簽)
TSPAN1 Protein Human 重組人 TSPAN1 蛋白 (aa 110-211, Fc 標(biāo)簽)
CD58 Protein Human 重組人 LFA-3 / CD58 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
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