公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供人皮膚成纖維樣細(xì)胞;HSF2說(shuō)明書(shū)的報(bào)價(jià),咨詢(xún),稱(chēng)技術(shù)服務(wù),咨詢(xún)選購(gòu)。
細(xì)胞名稱(chēng):人皮膚成纖維樣細(xì)胞;HSF2說(shuō)明書(shū)
細(xì)胞形態(tài): 細(xì)胞株
生長(zhǎng)特性:貼壁 懸浮 半貼壁
傳代時(shí)間:2-3天 3-5天
傳代比例:1:2~1:3 1:1~1:2
儲(chǔ)存:液氮
保存與運(yùn)輸: 干冰常溫運(yùn)輸
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶長(zhǎng)成致密單層后,已基本上飽和,為使細(xì)胞能繼續(xù)生長(zhǎng),同時(shí)
也將細(xì)胞數(shù)量擴(kuò)大,就必須進(jìn)行傳代(再培養(yǎng))。 傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞種保存下去的方法。同時(shí)也是利用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過(guò)程。懸浮型細(xì)胞直接分瓶就可以,而貼壁細(xì)胞需經(jīng)消化后才能分瓶。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細(xì)胞活力狀態(tài)良好的細(xì)胞株1420株,其中絕大部分是近年來(lái)從美國(guó)ATCC和NIH分批引進(jìn)的細(xì)胞種子,少部分來(lái)自全國(guó)各地細(xì)胞研究所,細(xì)胞來(lái)源可靠,背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好
傳代方法:細(xì)胞*匯合時(shí),倒掉舊液,加入消化液(0.25%*+0.03%EDTA)2ml消化,顯微鏡下觀察細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個(gè)細(xì)胞后棄掉*,加培養(yǎng)基混勻分瓶,T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml,T75瓶加培養(yǎng)基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培養(yǎng)。
培養(yǎng)是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究zui常用的手段之一,可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。由于細(xì)胞剛剛從活體組織分離出來(lái),故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細(xì)胞的生長(zhǎng)、代謝、繁殖提供有力的手段,同時(shí)也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。利用此方法還可直接服務(wù)于臨床實(shí)踐
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
XLD Agar
溴棕*銨瓊脂選擇分離和鑒別銅綠假單胞菌500g
Cetrimide Agar Base
*鹽瓊脂*的分離500g
Mannitol Salt Agar
梭菌強(qiáng)化培養(yǎng)基厭氧菌的培養(yǎng)計(jì)數(shù),尤其是食品和臨床樣品中的梭菌500g
Reinforced Clostridial Medium
哥倫比亞瓊脂分離培養(yǎng)苛養(yǎng)菌500g
Columbia Agar
沙氏葡萄糖肉湯酵母菌、霉菌以及其它耐酸菌培養(yǎng)500g
Sabouraud Dextrose Broth
沙氏葡萄糖瓊脂酵母菌、霉菌以及其它耐酸菌培養(yǎng)500g
Sabouraud Dextrose Agar
胰蛋白大豆肉湯用于菌落計(jì)數(shù)以及培養(yǎng)苛養(yǎng)和非苛養(yǎng)菌500g
Tryptic Soy Broth (Soybean-Casein Digest Medium)
胰蛋白大豆瓊脂用于無(wú)菌試驗(yàn)和多種菌的計(jì)數(shù)和分離培養(yǎng)500g
Tryptic Soy Agar (Soybean-Casein Digest Agar Medium)
馬鈴薯葡萄糖瓊脂霉菌和酵母菌的培養(yǎng)及計(jì)數(shù)500g
Potato Dextrose Agar
磷酸緩沖液pH7.2緩沖液和溶液500g
Phosphate Buffer, pH 7.2
緩沖氯化鈉-蛋白胨溶液pH7.0緩沖液和溶液500mL*10
BUFFERED SOD CHLOR PEPTONE
液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基(FTM)無(wú)菌實(shí)驗(yàn)的厭氧菌和需氧菌培養(yǎng)100mL*25
NIH硫乙醇酸鹽肉湯無(wú)菌實(shí)驗(yàn)的真菌和需氧菌培養(yǎng)500g
液體A(0.1%蛋白胨水)在USP中可用作FTM的替代品300mL*10
Fluid A
液體D(0.1%蛋白胨水和吐溫80)無(wú)菌實(shí)驗(yàn)中用作沖洗/稀釋液300mL*10
Fluid D
胰蛋白大豆肉湯無(wú)菌實(shí)驗(yàn)中用作沖洗/稀釋液(樣品含油和*)100mL*25
Tryptic Soy Broth
蛋白胨具有很高的蛋白胨和氨基酸含量,非常適合細(xì)菌的生長(zhǎng)500g
Bacto™ Peptone
脫脂奶粉用于制備微生物培養(yǎng)基。該類(lèi)培養(yǎng)基一般用于保存和增殖乳酸菌500g
Skim Milk
LB肉湯,Lennox加富培養(yǎng)基,用于分子微生物研究中保存和培養(yǎng)重組大腸桿菌菌株500g
LB Broth, Lennox
BactoTM瓊脂*化有益的鈣鎂離子比例同時(shí)減少有害離子含量454g
BactoTM Agar
平板計(jì)數(shù)瓊脂高營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基,用于分離、計(jì)數(shù)異養(yǎng)或“富營(yíng)養(yǎng)”的細(xì)菌,水、廢水、食品、乳制品的細(xì)菌計(jì)數(shù)500g
Plate Count Agar
R2A瓊脂低營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基,用于水檢測(cè)中分離生長(zhǎng)緩慢的“貧營(yíng)養(yǎng)”的細(xì)菌和對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求較低的細(xì)菌500g
R2A Agar
m HPC瓊脂高營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基,用于水檢測(cè)中分離、計(jì)數(shù)異養(yǎng)或“富營(yíng)養(yǎng)”的細(xì)菌500g
m-HPC Agar
D/E中和瓊脂能中和抗微生物的化學(xué)試劑,用于環(huán)境標(biāo)本中檢測(cè)和計(jì)數(shù)表面微生物500g
D/E (Dey/Engley) Neutralizing Agar
D/E中和肉湯檢測(cè)消毒劑和防腐劑的消毒與衛(wèi)生效果500g
D/E (Dey/Engley) Neutralizing Broth
微生物含量測(cè)試瓊脂(胰蛋白大豆瓊脂含*和吐溫80)環(huán)境監(jiān)測(cè)中的多種菌的計(jì)數(shù)500g
Microbial Content Test Agar(Trypticase™ Soy Agar with Lecithin and Polysorbate 80)
營(yíng)養(yǎng)肉湯非苛養(yǎng)要求微生物的普通培養(yǎng)500g
Nutrient Broth
營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)多種微生物500g
Nutrient Agar
麥芽浸出液瓊脂分離計(jì)數(shù)酵母和霉菌500g
Malt Extract Agar
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