公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的人胚腎細(xì)胞;293E*
的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
細(xì)胞名稱:穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的人胚腎細(xì)胞;293E*
細(xì)胞形態(tài): 細(xì)胞株
生長特性:貼壁 懸浮 半貼壁
傳代時(shí)間:2-3天 3-5天
傳代比例:1:2~1:3 1:1~1:2
儲存:液氮
保存與運(yùn)輸: 干冰常溫運(yùn)輸
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后,已基本上飽和,為使細(xì)胞能繼續(xù)生長,同時(shí)
也將細(xì)胞數(shù)量擴(kuò)大,就必須進(jìn)行傳代(再培養(yǎng))。 傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞種保存下去的方法。同時(shí)也是利用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過程。懸浮型細(xì)胞直接分瓶就可以,而貼壁細(xì)胞需經(jīng)消化后才能分瓶。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細(xì)胞活力狀態(tài)良好的細(xì)胞株1420株,其中絕大部分是近年來從美國ATCC和NIH分批引進(jìn)的細(xì)胞種子,少部分來自全國各地細(xì)胞研究所,細(xì)胞來源可靠,背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好
傳代方法:細(xì)胞*匯合時(shí),倒掉舊液,加入消化液(0.25%*+0.03%EDTA)2ml消化,顯微鏡下觀察細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個(gè)細(xì)胞后棄掉*,加培養(yǎng)基混勻分瓶,T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml,T75瓶加培養(yǎng)基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培養(yǎng)。
培養(yǎng)是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究zui常用的手段之一,可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。由于細(xì)胞剛剛從活體組織分離出來,故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細(xì)胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段,同時(shí)也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。利用此方法還可直接服務(wù)于臨床實(shí)踐
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
Baird-Parker 瓊脂基礎(chǔ)1000(g)
亞碲酸鹽卵黃增菌液5mL/支×10(g)
凍干血漿0.5mL/支×10(g)
DNA酶瓊脂100(g)
7.5%氯化鈉肉湯250(g)
7.5%氯化鈉肉湯1000(g)
普通肉湯培養(yǎng)基250(g)
亞碲酸鈉肉湯培養(yǎng)基基礎(chǔ)250(g)
葡萄球菌增菌肉湯250(g)
葡萄球菌選擇性瓊脂250(g)
甲苯胺藍(lán)-DNA瓊脂100(g)
卵黃*高鹽瓊脂基礎(chǔ)250(g)
改良Giolitti-Cantoni 肉湯250(g)
Vogel–Johnson 瓊脂基礎(chǔ)250(g)
哥倫比亞CNA瓊脂100(g)
堿性蛋白胨水(APW)250(g)
堿性蛋白胨水(APW)1000(g)
堿性蛋白胨水(APW)250(g)
3%氯化鈉堿性蛋白胨水(APW)250(g)
TCBS瓊脂250(g)
TCBS瓊脂1000(g)
氯化鈉*肉湯基礎(chǔ)(SCPB)250(g)
*瓊脂250(g)
四號瓊脂250(g)
我妻氏培養(yǎng)基基礎(chǔ)250(g)
60g/L氯化鈉蛋白胨肉湯250(g)
氯化鈉三糖鐵250(g)
胰胨大豆瓊脂斜面(含3% NaCl)250(g)
42℃生長培養(yǎng)基250(g)
Hugh-Leifon葡萄糖肉湯(HLGB)250(g)
氯化鈉結(jié)晶紫增菌液250(g)
氯化鈉蔗糖瓊脂250(g)
嗜鹽菌選擇性瓊脂250(g)
氯化鈉血瓊脂基礎(chǔ)250(g)
霍亂雙糖鐵瓊脂250(g)
T1N1瓊脂250(g)
T1N0肉湯250(g)
T1N3肉湯250(g)
*葡萄糖斜面瓊脂(AGS)100(g)
改良纖維二糖**瓊脂基礎(chǔ)(mCPC)250(g)
嗜鹽性試驗(yàn)培養(yǎng)基250(g)
氨芐*麥康凱瓊脂基礎(chǔ)250(g)
RS瓊脂250(g)
AHM鑒別用培養(yǎng)基250(g)
脫脂奶蔗糖胰蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基250(g)
蔗糖胰蛋白胨肉湯250(g)
胰酪胨大豆酵母浸膏肉湯(TSB-YE)250(g)
胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂(TSA-YE)250(g)
李氏菌選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)(MMA)250(g)
糖發(fā)酵肉湯基礎(chǔ)250(g)
李氏菌增菌肉湯(LB1,LB2)基礎(chǔ)250(g)
七葉苷培養(yǎng)基10(g)
半固體動(dòng)力培養(yǎng)基250(g)
牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)250(g)
PALCAM培養(yǎng)基基礎(chǔ)250(g)