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上海莼試生物技術(shù)有限公司

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動(dòng)物 DNAout250mL售后服務(wù)

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更新時(shí)間:2017-06-28 11:43:53瀏覽次數(shù):363次

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動(dòng)物 DNAout250mL售后服務(wù)詳細(xì)介紹:

試劑的取用規(guī)則:
(1)試劑不能與手接觸。
(2)要用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,不準(zhǔn)用同一種工具同時(shí)連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后,應(yīng)將工具洗凈(藥勺要擦干)后,方可取用另一種試劑。
(3)試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯(cuò)瓶蓋和滴管,絕不允許張冠李戴,用完后將瓶放回原處
(4)已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(nèi)。
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動(dòng)物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時(shí),上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,上層為無色水相和一個(gè)中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,進(jìn)一步操作見后。用異丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙醇,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
   C9orf153
4號(hào)染色體開放閱讀框19抗體      C4orf19
4號(hào)染色體開放閱讀框27抗體      C4orf27
4號(hào)染色體開放閱讀框22抗體      C4orf22
4號(hào)染色體開放閱讀框14抗體      C4orf14
X染色體開放閱讀框21抗體      CXorf21
磷酸化C端結(jié)合蛋白1抗體      phospho-CTBP1 (Ser422)
鈣粘附蛋白8抗體      Cadherin 8
8號(hào)染色體開放閱讀框192抗體      C6orf192
21號(hào)染色體開放閱讀框87抗體      C21orf87
21號(hào)染色體開放閱讀框91抗體      C21orf91
22號(hào)染色體開放閱讀框25抗體      C22orf25
20號(hào)染色體開放閱讀框196抗體      C20orf196
5號(hào)染色體開放閱讀框35抗體      C5orf35
20號(hào)染色體開放閱讀框194抗體      C20orf194
4號(hào)染色體開放閱讀框32抗體      C4orf32
5號(hào)染色體開放閱讀框20抗體      C5orf20
胱抑素D/半*蛋白酶抑制劑D抗體      Cystatin D
胱抑素8/半*蛋白酶抑制劑8抗體      CST8
胱抑素9/半*蛋白酶抑制劑9抗體      CST9
胱抑素S/半*蛋白酶抑制劑S抗體      Cystatin S
煙堿型乙酰*受體α3抗體      CHRNA3
3號(hào)染色體開放閱讀框33抗體      C3orf33
3號(hào)染色體開放閱讀框39抗體      C3orf39
3號(hào)染色體開放閱讀框59抗體      C3orf59
5號(hào)染色體開放閱讀框51抗體 
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