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ARPE-19人視網(wǎng)膜上皮細胞

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

聯(lián)系方式：陳浩查看聯(lián)系方式

更新時間：2017-10-20 16:29:56瀏覽次數(shù)：278次

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經(jīng)營模式：生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品：1400條

所在地區(qū)：上海上海市

聯(lián)系人：陳浩 （銷售）

產(chǎn)品簡介

ARPE-19人視網(wǎng)膜上皮細胞
Human Retinal Epithelial Cells
貨號：ARPE-19
價格：￥1500.0
規(guī)格： 1*10?6?  
細胞介紹
該細胞系源自于一名19歲車禍罹難的健康男性的視網(wǎng)膜組織，由Amy Aotaki-Keen建系于1986年。該細胞系表達視網(wǎng)膜色素細胞*的分子標(biāo)記如胞內(nèi)*結(jié)合蛋白和PRE-65。

詳細介紹

ARPE-19

人視網(wǎng)膜上皮細胞

Human Retinal Epithelial Cells

貨號：ARPE-19

價格：￥1500.0

規(guī)格： 1*10 6   

細胞介紹
該細胞系源自于一名19歲車禍罹難的健康男性的視網(wǎng)膜組織，由Amy Aotaki-Keen建系于1986年。該細胞系表達視網(wǎng)膜色素細胞*的分子標(biāo)記如胞內(nèi)*結(jié)合蛋白和PRE-65。

ARPE-19人視網(wǎng)膜上皮細胞細胞特性
1）來源：視網(wǎng)膜
2）形態(tài)：上皮細胞樣
3）含量：>1x106 個/mL
4）污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

ARPE-19人視網(wǎng)膜上皮細胞運輸和保存：使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細胞。收到細胞后，可在1000RPM，常溫條件下，離心5min后，于潔凈操作臺棄去上清，加入*使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至10cm培養(yǎng)皿或者T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
細胞用途：僅供科研使用。
                       
ARPE-19人視網(wǎng)膜上皮細胞細胞培養(yǎng)步驟
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備DMEM/F12培養(yǎng)基(DMEM/F12，GIBCO，貨號10565-042)；胎牛血清，10%；雙抗1%。
2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。
下面以T25瓶為例；
      1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml*，細胞變圓脫落后，加入2ml*培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
      2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至zui終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。
      3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。


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