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當(dāng)前位置:壇墨質(zhì)檢科技股份有限公司>>技術(shù)文章>>牛奶中左旋咪唑殘留量測(cè)定的前處理方法
左旋咪唑作為一種廣譜型抗線蟲藥,藥源豐富,被廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖企業(yè),效果良好。但不合理地使用左旋咪唑會(huì)造成動(dòng)物產(chǎn)品中殘留,研究表明,人體攝入過量左旋咪唑可引起畸變、癌變等癥狀,嚴(yán)重危害人類健康。為此我國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部和國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局2019年發(fā)布的GB 31650-2019《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中獸藥最/大殘留*》中明確規(guī)定了左旋咪唑在動(dòng)物靶組織中的殘留*,并且規(guī)定泌乳期和產(chǎn)蛋期禁用。
本文闡述了如何將左旋咪唑從樣品基質(zhì)中分離提取出來,并經(jīng)過凈化后,轉(zhuǎn)化成高效液相色譜儀可以檢測(cè)的形式。以提取、凈化為重點(diǎn),依據(jù)國(guó)標(biāo)GB 29681-2013,為檢測(cè)人員和相關(guān)領(lǐng)域研究人員提供一定的參考。
檢測(cè)項(xiàng)目:左旋咪唑
應(yīng)用范圍:牛奶
前處理儀器:
分析天平(感量0.00001 g和0.01 g);均質(zhì)機(jī);冷凍高速離心機(jī);電熱恒溫水浴鍋;旋渦混合器;茄形瓶(50 mL);離心管;濾膜(0.45 μm)。
檢測(cè)儀器: HPLC-PDA
試樣的制備與保存
取適量新鮮或冷藏的空白或供試牛奶,混合均質(zhì)。
取均質(zhì)后的供試樣品,作為供試試料;
取均質(zhì)后的空白樣品,作為空白試料;
取均質(zhì)后的空白樣品,添加適宜濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液,作為空白添加試料。
試料于零下20 ℃以下保存。
前處理方法
稱取試料5 g± 0.05 g,于離心管中,加碳酸鹽緩沖液5 mL,加乙酸乙酯10 mL,混勻,6000 r/min離心10 min,取上清液于茄形瓶中,再加乙酸乙酯10 mL萃取一次,合并兩次上清液,于50 ℃水浴旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干,加碳酸鹽緩沖液5 mL溶解殘余物,備用。
2.凈化
C18柱(3 mL/500 mg)依次用水3 mL、甲醇3 mL和碳酸鹽緩沖液3 mL活化,取備用液過柱,用水3 mL淋洗,用甲醇5 mL洗脫,收集洗脫液,于50 ℃水浴氮?dú)獯蹈?,用流?dòng)相1.0 mL溶解殘余物,濾膜過濾,供高效液相色譜測(cè)定。
1.左旋咪唑用甲醇配成1 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,在2 ℃~4 ℃保存,可使用3個(gè)月。
2.本方法使用碳酸鹽緩沖液提取,乙酸乙酯萃取,C18固相萃取柱凈化的方式進(jìn)行目標(biāo)化合物的提取凈化。
3.本方法采用兩次萃取的方式,提高目標(biāo)化合物的回收率。
4.為保證固相萃取凈化效果,過柱時(shí)需要控制流速,使溶液一滴一滴地流下。水淋洗后*抽干小柱,再進(jìn)行洗脫。
5.左旋咪唑也可以使用液質(zhì)聯(lián)用儀進(jìn)行檢測(cè),同時(shí)添加相對(duì)應(yīng)的鹽酸鹽同位素內(nèi)標(biāo),進(jìn)行回收率的校正。
GB 29681-2013 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 牛奶中左旋咪唑殘留量的測(cè)定 高效液相色譜法
圖1 牛奶中左旋咪唑殘留量測(cè)定的前處理流程圖
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