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行業(yè)產(chǎn)品

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上海李記生物科技有限公司


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2 x Taq PCR Master Mix

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產(chǎn)品型號D1101L1146

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

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更新時間:2017-11-08 09:51:25瀏覽次數(shù):196次

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產(chǎn)品簡介

2 x Taq PCR Master Mix是即用型的常規(guī)PCR預(yù)混合溶液, 含有Taq DNA Polymerase、dNTP混合物、 MgCl2以及優(yōu)化的緩沖體系, 它以2×的濃度形式存在, 反應(yīng)時只需加入所需引物和模板, 用水稀釋即可立刻配制完P(guān)CR體系, 大大地簡化了操作過程, 減少了PCR操作過程中的污染。 本產(chǎn)品中含有PCR產(chǎn)物具有3’-dA突出端, 可輕松克隆至T載體。

詳細(xì)介紹

2 x Taq PCR Master Mix

產(chǎn)品名稱

貨號

規(guī)格

保存

價格(元)

2 x Taq PCR Master Mix

D1101L1146

1 mL

-20℃

200

 

產(chǎn)品簡介

× Taq PCR Master Mix是即用型的常規(guī)PCR預(yù)混合溶液,含有Taq DNA Polymerase、dNTP混合物、MgCl2以及優(yōu)化的緩沖體系,它以2×的濃度形式存在,反應(yīng)時只需加入所需引物和模板,用水稀釋即可立刻配制完P(guān)CR體系。本產(chǎn)品中含有PCR產(chǎn)物具有3’-dA突出端,可輕松克隆至T載體。

運輸與保存方法
冰袋運輸。收到產(chǎn)品后放到-20 ºC保存,有效期12月以上。

使用方法

1.  反應(yīng)體系配制(50μl):

模板DNA

optional

引物1(10 μM)

μL

引物2(10 μM)

μL

2× PCR Master Mix (With Dye)

25μL

ddH2O

up to 50μL

注:針對不同模板的反應(yīng)濃度有所不同,下表為50μl反應(yīng)體系*模板使用量,僅供參考。

人基因組DNA

0.1~1 μg

大腸桿菌基因組DNA

10~100 ng

λDNA

0.5~5 ng

質(zhì)粒DNA

0.1~10 ng

2.  PCR循環(huán)反應(yīng)條件

94

5 min(預(yù)變性)

94

30 sec

35個循環(huán)

55℃*

30 sec    

72

30 sec

72

7 min(*延伸)

注:退火溫度需要根據(jù)引物的Tm值調(diào)整,一般設(shè)置成低于引物Tm值1-2℃即可。

注意事項
1.由于Taq DNA Polymerase室溫下也有一定的反應(yīng)活性,PCR反應(yīng)體系配制需在冰上進(jìn)行。體系混勻后快速置于PCR儀進(jìn)行反應(yīng)。這樣可以減少反應(yīng)準(zhǔn)備階段的非特異擴(kuò)增,有助于得到更好的PCR結(jié)果。
2. 引物設(shè)計注意事項
2.1 引物3’端zui后一個堿基選擇C或G,端zui后8個堿基應(yīng)避免出現(xiàn)連續(xù)錯配;端盡量避免發(fā)卡結(jié)構(gòu)的出現(xiàn);
2.2 引物Tm值控制在55℃-65℃之間;
2.3 引物額外附加序列,即與模板非配對序列,不應(yīng)參與引物Tm值計算;

2.4 引物GC含量控制在40%-60%之間;
2.5 正向引物和反向引物Tm值以及GC含量盡可能*。

相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品名稱貨號規(guī)格保存價格(元)
Super SYBR Green qPCR Master MixD1101L11441 mL-20℃1050
Super SYBR Green qPCR Master MixD1101L11455 x 1mL-20℃2350
D1101L11475 x 1 mL-20℃850

 

 

 


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