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上皮細(xì)胞株常見問題解析
2018-9-18 閱讀(228)
| 提 供 商 | 上海邦景實(shí)業(yè)有限公司 | 資料大小 | 165.3KB |
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| 資料圖片 | 下載次數(shù) | 30次 | |
| 資料類型 | JPG 圖片 | 瀏覽次數(shù) | 228次 |
上皮細(xì)胞株常見問題解析
一、為什么培養(yǎng)基中可以省去酚紅？
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為pH值的指示劑，研究表明，酚紅可以模擬固醇類激素的作用（特別是雌激素），為避免固醇類反應(yīng)，用無酚紅培養(yǎng)基。
二、在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后，有效期是多長(zhǎng)？
一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時(shí)，您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它。因?yàn)橐恍┛股睾脱逯械幕境煞衷诮鈨龊缶烷_始降解。
三、如何選用培養(yǎng)基?
選擇培養(yǎng)基沒有一定標(biāo)準(zhǔn)，有幾點(diǎn)建議可供參考：
建立某種細(xì)胞株所用的培養(yǎng)基應(yīng)該是培養(yǎng)這種細(xì)胞的培養(yǎng)基。可以查閱文獻(xiàn)，或在購(gòu)買細(xì)胞株時(shí)咨詢。
本單位慣用的培養(yǎng)基不妨一試，許多培養(yǎng)基可以適合多種細(xì)胞。
根據(jù)細(xì)胞株的特點(diǎn)、實(shí)驗(yàn)的需要來選擇培養(yǎng)基。如小鼠細(xì)胞株多選1640；進(jìn)行細(xì)胞雜交、基因轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)，可選擇IMDM。
用多種培養(yǎng)基培養(yǎng)目的細(xì)胞，觀察其生長(zhǎng)狀態(tài)，可以用生長(zhǎng)曲線、集落形成率等指標(biāo)判斷，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果選擇*培養(yǎng)基，這是zui客觀的方法，但比較繁瑣。
四、選擇便宜的培養(yǎng)基品種成本就低嗎？
通常，培養(yǎng)基可以適合多種細(xì)胞，細(xì)胞也可以在不同培養(yǎng)液中生長(zhǎng)；例如在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長(zhǎng)。
培養(yǎng)基養(yǎng)份不同會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生果不同，病毒或蛋白表達(dá)不同，應(yīng)該選擇效果的培養(yǎng)基，考慮生物制品的綜合成本；
zui終目的是追求生物制品的得率——得率高則成本低。
五、細(xì)胞生長(zhǎng)質(zhì)量很好，為什么病毒、蛋白表達(dá)量沒有提高？
細(xì)胞生長(zhǎng)質(zhì)量高是高表達(dá)的必要條件。
采用細(xì)胞的疫苗是體外培養(yǎng)一定量的動(dòng)物細(xì)胞并接種病毒，利用病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖，得到預(yù)期的病毒抗原，然后制成疫苗。細(xì)胞生長(zhǎng)質(zhì)量包括細(xì)胞密度和形態(tài)，沒有好的細(xì)胞生長(zhǎng)質(zhì)量就不可能有高的表達(dá)量。
但要注意的是，細(xì)胞生長(zhǎng)質(zhì)量好、密度厚度大時(shí)候病毒接種量也應(yīng)該相應(yīng)增大，表達(dá)量才會(huì)提高，否則前期的高質(zhì)量細(xì)胞培養(yǎng)就可能浪費(fèi)了。
同時(shí)病毒、蛋白的表達(dá)、分泌在一定濃度下可能會(huì)飽和，因此如欲獲得高表達(dá)，還須研究合適的收液時(shí)間和次數(shù)。
