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上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品: 進口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |

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人正常肺上皮細(xì)胞購買注意事項
2018-12-4 閱讀(153)
提 供 商 | 上海邦景實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 14KB |
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資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數(shù) | 153次 |
購買上海邦景物細(xì)胞注意事項(邦景生物)發(fā)布
一、客戶收到細(xì)胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;
收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費發(fā)送一株細(xì)胞。
二、如為貼壁細(xì)胞,請在顯微鏡下觀察細(xì)胞密度:
1. 未超過80%匯合度時,用75%酒精(建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水,噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作;然后打開蓋子,先用槍頭把培養(yǎng)基吸出10ml左右,放在離心管里,然后瓶口過火(嚴(yán)禁直接傾倒),這樣可以保證不污染,再用10ml的移液管,將剩余的培液全部吸出,放于離心管中,培養(yǎng)瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培養(yǎng)16hr(時間根據(jù)細(xì)胞生長情況調(diào)整)之后,傳代或者凍存。
2. 超過80%匯合度時,請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1) 棄去培養(yǎng)液,用3ml PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次;
2) 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于T25培養(yǎng)瓶中,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細(xì)胞隨即脫落下來;
3) 加入6-8ml*培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中,按要求分瓶。
三、如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
注意:換液時一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好。