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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品： 進(jìn)口elisa試劑盒，細(xì)胞株，細(xì)胞系，菌種 |
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- www.bhsy-e.com/
| 參考價(jià) | 面議 |
- 型號
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- 所在地 上海市
更新時(shí)間：2023-02-23 09:21:10瀏覽次數(shù)：207
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商品介紹：
名稱 RKO-E6 (人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞)
別稱 RKOE6
種屬 人類
年齡（性別） 不詳
組織來源 結(jié)腸癌，轉(zhuǎn)染插入到pCMV中的HPVE6
生長特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
背景描述 RKO-E6細(xì)胞是用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染pCMV-E6的結(jié)腸癌RKO細(xì)胞系。RKO-E6細(xì)胞含有穩(wěn)定整合受控於巨細(xì)胞病毒啟動(dòng)子的人乳頭狀病毒(HPV)E6癌基因，RKO-E6細(xì)胞和它的母系RKO一起可用于研究p53缺失引起的細(xì)胞參數(shù)改變p53介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄和凋亡等。
生物安全等級 2 [Contains HPV6 and CMV viral sequences]
生長培養(yǎng)基 MEM＋10% FBS＋1% P/S
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
凍存條件
凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-2578
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 | 貨號 |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細(xì)胞系 | BJ-X96744 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
| 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。
Rosetta(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10 暗盒 (5×7 英寸 )1個(gè)
Rosetta(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10 氨基磁珠2mL
Rosetta-gami(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10 氨芐溶液 ,50mg/mL10mL
Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10 氨芐干粉1g
Tuner(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10 φX174RF Ⅱ DNA30μg
Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗羊IgG
Cy5標(biāo)記的兔抗羊IgG
Cy3標(biāo)記的兔抗羊IgG
Alexa Fluor 488標(biāo)記的驢抗羊IgG
辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗馬IgM
人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞：RKO-E6大鼠二?；视?/span>(DAG)elisa檢測試劑盒
大鼠二?；视?/span>(DAG/DG)elisa分析檢測試劑盒
大鼠二?；视?/span>(DAG/DG)elisa檢測試劑盒
大鼠法尼醇X受體(FXR)elisa分析檢測試劑盒
大鼠法尼醇X受體(FXR)elisa檢測試劑盒
我司全程提供細(xì)胞生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存細(xì)胞株說明書信息，我們專業(yè)您的細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！產(chǎn)品僅用于科研
