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上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品： 進(jìn)口elisa試劑盒，細(xì)胞株，細(xì)胞系，菌種 |
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更新時間：2023-03-06 09:44:06瀏覽次數(shù)：132
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操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。
商品屬性：
產(chǎn)品名稱：人甲狀腺導(dǎo)管癌細(xì)胞：TT
貨號：BJ-X96773
規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
分類：細(xì)胞系
商品介紹：
名稱 TT (人甲狀腺導(dǎo)管癌細(xì)胞) 種屬 人類 年齡（性別） 女性，77歲 組織來源 甲狀腺；髓質(zhì)；癌 生長特性 貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣 背景描述 TT細(xì)胞是從77歲女性甲狀腺髓質(zhì)癌患者的穿刺活檢樣本中建立。TT細(xì)胞持續(xù)產(chǎn)生高水平的降血鈣素和CEA，在更換培養(yǎng)基后24小時和72小時在培養(yǎng)基中檢測到的免疫活性的降血鈣素濃度分別為3900pg/百萬細(xì)胞和7700pg/百萬細(xì)胞。72小時后，CEA積累濃度超過27ng/百萬細(xì)胞。 生物安全等級 1 生長培養(yǎng)基 Ham's F-12K＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例 1:2-1:4 推薦換液頻率 2~3次/周 倍增時間 ~80小時 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-1803 ECACC; 92050721 |
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：產(chǎn)品僅用于科研
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
白色念珠菌ATCC90029凍干粉 改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基90mm
雪白根霉 食油假單胞菌
豬霍亂沙門氏菌豬霍亂亞種 漢遜德巴利酵母
福氏志賀菌凍干粉 大腸埃希氏菌
肺炎克雷伯氏菌 嗜肺軍團(tuán)菌
磷酸化糖原合酶激酶3α/β
人α亞基人絨毛膜
人類乳頭狀瘤病毒16
人類乳頭狀瘤病毒18E6
白介素1α 前體肽
人甲狀腺導(dǎo)管癌細(xì)胞：TT大鼠核連蛋白2(NUCB2)elisa檢測試劑盒
大鼠核受體亞家族1D組成員2(NR1D2)elisa檢測試劑盒
大鼠核受體亞家族3C組成員1(NR3C1)elisa檢測試劑盒
大鼠核糖核酸酶A3(RNASE3)elisa檢測試劑盒
大鼠核糖核酸酶H(RNASEH)elisa檢測試劑盒
