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上海邦景實業(yè)有限公司
主營產品: 進口elisa試劑盒,細胞株,細胞系,菌種 |

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更新時間:2023-05-07 09:15:48瀏覽次數:254
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操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
商品屬性:
產品名稱:人宮頸癌細胞:Hela 229
貨號:BJ-X96940
規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
分類:細胞系
商品介紹:
名稱 Hela 229 (人宮頸癌細胞) 種屬 人類 年齡(性別) 女性,31歲 組織來源 子宮頸 生長特性 貼壁細胞 細胞形態(tài) 上皮細胞樣 背景描述 Relatively resistant to polioviruses. The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining. This cell line can be readily adapted to growth in suspension. 生物安全等級 2 生長培養(yǎng)基 RPMI-1640+10% FBS+1%P/S 推薦傳代比例 1:3-1:8 推薦換液頻率 2~3次/周 倍增時間 ~11小時 (JCRB) 凍存條件 凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 保藏機構 ATCC; CCL-2.1 CCTCC; GDC0335 ECACC; 86090201 JCRB; JCRB9086 |
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:產品僅用于科研
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
DNA 電泳分子量標準 (100-1500 bp)50 次 G 鉀鹽溶液 ,200mg/mL1 Mu
DNA 電泳分子量標準 (100-5000 bp)50 次 親和硅烷 25mL
DNA 電泳分子量標準 (300-10000 bp)50 次 親和層析柱6 mL
DNA 電泳分子量標準 (2)(50-400 bp)50 次 親和層析柱50 mL
DNA 電泳分子量標準 (2)(300-5000 bp)50 次 親和層析柱30 mL
鹿環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)elisa檢測試劑盒
鹿紅細胞膜蛋白(EMP)elisa檢測試劑盒免費代測
鹿次氧化酶elisa檢測試劑盒
鹿γ干擾素(IFNG)elisa檢測試劑盒
類人猿elisa檢測試劑盒
人宮頸癌細胞:Hela 229大鼠α1-酸性糖蛋白(α1AGP)elisa檢測試劑盒
大鼠α1-微球蛋白(α1M)elisa檢測試劑盒
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