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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 進(jìn)口elisa試劑盒，細(xì)胞株，細(xì)胞系，菌種 |
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更新時(shí)間：2023-05-25 09:32:39瀏覽次數(shù)：256
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操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
商品屬性：
產(chǎn)品名稱：人膀胱癌細(xì)胞：TCCSUP
貨號(hào)：BJ-X96934
規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
分類：細(xì)胞系
商品介紹：
名稱 TCCSUP (人膀胱癌細(xì)胞) 種屬 人類 年齡（性別） 女性，67歲 組織來源 膀胱 生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣 背景描述 The TCCSUP line was isolated in 1974 from an anaplastic transitional cell carcinoma (TCC) in the neck of the urinary bladder. 生物安全等級(jí) 1 生長(zhǎng)培養(yǎng)基 MEM＋10% FBS＋1%P/S 推薦傳代比例 1:2-1:3 推薦換液頻率 2~3次/周 倍增時(shí)間 ~28小時(shí) (PubMed=3708594); 46小時(shí) (PubMed=25984343); 49.2小時(shí) (PubMed=26055179); ~30-40小時(shí) (DSMZ). 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 抗原表達(dá)情況 HLA 2, 3, 7, 12 保藏機(jī)構(gòu) ATCC; HTB-5 DSMZ; ACC-377 |
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：產(chǎn)品僅用于科研
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
P450 2D6抗體
1號(hào)染色體開放閱讀框186抗體
乳腺癌相關(guān)抗原抗體
細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白4抗體
b5抗體
FITC標(biāo)記的芳基硫酸酯酶B抗體
FITC標(biāo)記的磷酸化內(nèi)收蛋白a1抗體
FITC標(biāo)記的血管生成素樣蛋白3抗體
FITC標(biāo)記的膜粘連蛋白7抗體
FITC標(biāo)記的去整合素樣金屬8抗體
人膀胱癌細(xì)胞：TCCSUP大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
