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上海邦景實業(yè)有限公司
主營產品： 進口elisa試劑盒，細胞株，細胞系，菌種 |
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更新時間：2022-05-19 10:40:42瀏覽次數(shù)：199
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操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
商品屬性：
產品名稱：大鼠髖臼軟骨細胞
貨號：BJ-X97737
規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
分類：原代細胞
商品介紹：
名稱 大鼠髖臼軟骨細胞 3.產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 大鼠髖臼軟骨細胞分離自髖關節(jié)軟骨組織，髖關節(jié)是人體大、穩(wěn)定的關節(jié)之一，是典型的球臼關節(jié)。髖關節(jié)既具有良好的內在穩(wěn)定性，也具有靈活的活動性。髖臼位于髖骨外側面中央，呈半球形深凹，直徑約30~50mm，表面覆蓋厚約2mm的透明關節(jié)軟骨，呈半月形分布。中央是髖臼窩，無軟骨覆蓋，由哈佛腺充填，可以隨關節(jié)內壓力的增減擠出或者吸入關節(jié)液，以維持關節(jié)內壓力的平衡。髖臼邊緣的環(huán)形關節(jié)盂唇可以加深、加寬髖臼，使髖臼容納股骨頭的大部并處于穩(wěn)定的位置，加了髖關節(jié)的穩(wěn)定性。幼稚的關節(jié)軟骨細胞位于關節(jié)軟骨組織的表層，單個分布、體積較小、呈橢圓形，長軸與關節(jié)軟骨表面平行，越向深層的關節(jié)軟骨細胞體積之間增大呈圓形，細胞核圓形或卵圓形、染色淺，細胞質弱嗜堿性，常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的關節(jié)軟骨細胞多2-8個成群分布于關節(jié)軟骨陷窩內，這些關節(jié)軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成，稱為同源細胞群。電鏡下，關節(jié)軟骨細胞有突起和皺褶，細胞質內有大量的粗面內質網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中，關節(jié)軟骨細胞收縮為不規(guī)則形，在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的關節(jié)軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。 5.方法簡介： 公司實驗室分離的大鼠髖臼軟骨細胞采用膠原酶聯(lián)合中性消化制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。 6.質量檢測： 公司實驗室分離的大鼠髖臼軟骨細胞經Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次； 生長特性 貼壁 細胞形態(tài) 梭形、多角形 傳代特性 可傳3代左右 消化液 0.25% 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% |
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：產品僅用于科研
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
卡爾斯伯酵母 胰蛋白胨大豆瓊脂表面培養(yǎng)基60mm/25cm2
冬蟲夏草 土壤伯克氏菌
深黃被孢霉 間型酒香酵母
蘇云金芽胞桿菌柏氏變種Bacillusthuringiensisvar.berliner 莢膜紅細菌
嗜熱脂肪芽孢桿菌ATCC7953凍干粉 海洋鹽單胞菌
大鼠免疫球蛋白樣EGF樣域激酶1(Tie1)elisa檢測試劑盒
大鼠密封蛋白(OCLN)elisa檢測試劑盒
大鼠酶原顆粒膜糖蛋白(GP2)elisa檢測試劑盒
大鼠錨定蛋白重復域蛋白1(ANKRD1)elisa檢測試劑盒
大鼠絡絲蛋白(RL)elisa檢測試劑盒
大鼠髖臼軟骨細胞人MAX二聚化蛋白1(MXD1)elisa檢測試劑盒
人MYC誘導核抗原(MINA)elisa分析檢測試劑盒
人MYC誘導核抗原(MINA)elisa檢測試劑盒
人N -甲基- D -天冬抗體IgG(NMDA Antibody IgG)elisa分析檢測試劑盒
人N -甲基- D -天冬抗體IgG(NMDA Antibody IgG)elisa檢測試劑盒
