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上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品： 進口elisa試劑盒，細胞株，細胞系，菌種 |
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更新時間：2022-06-22 14:52:44瀏覽次數(shù)：194
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中文名稱：重組煙草蝕紋病毒蛋白酶
英文名稱：rTEV Protease
產(chǎn)品規(guī)格：1000U
發(fā)貨周期：1～3天
產(chǎn)品貨號：BJ-F0165107
產(chǎn)品介紹：
重組型TEV蛋白酶（rTEV）是經(jīng)過基因工程改造和純化后的重組蛋白酶，不僅保持天然TEV酶的功能活性，且在廣譜的溫度范圍內(nèi)表現(xiàn)出更好的穩(wěn)定性和特異性。rTEV是一種用來切除融合蛋白上親和標簽的常用工具酶，具有很的位點特異性，嚴格識別七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S)，切割位點在和甘/絲之間。普遍應(yīng)用的七氨基酸序列為：Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEV在pH7.0，30℃時可達到佳活性，但在pH6.0-8.5和溫度4-30℃的廣泛范圍內(nèi)皆有活性（見表1），使得反應(yīng)條件的選擇可根據(jù)目的蛋白的情況而靈活變動。另外rTEV切割后也能用其N端的6×His標簽，通過Ni-NTA樹脂去除，以達到純化目的蛋白的目的。 影響天然TEV酶活性的常見因素：1）PMSF和AEBSF（1mM），TLCK（1mM），Bestatin（1mg/ml）、Pestatin A（1mM），EDTA（1mM）以及E-64（3mg/ml），以上這些蛋白酶抑制劑對rTEV的活性沒有影響；2）Zn離子（＞5mM）對rTEV活性有抑制；3）與半胱反應(yīng)的試劑也是rTEV的潛在抑制劑。 來源：大腸桿菌 外觀：無色透明液體 比活力：5U/μl 活性定義：在1×rTEV Buffer（50mM Tris，pH8.0，0.5mM?EDTA，1mM?DTT）中，30℃反應(yīng)1h，剪切>85%的3μg底物所需要的酶量定義為一個活性單位。 純化（Purification?）：Ni親和純化 純度：≥95%（by SDS-PAGE） 產(chǎn)品組份： rTEV Protease（5U/μl）—————200μl rTEV Buffer 1（20×）——————2ml rTEV Buffer 2（1000×）—————50μl 儲存條件：-20℃，有效期一年。 |
使用方法：本產(chǎn)品僅用于科研
注意：標本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封；每袋裝一份標本。同時也將標本有關(guān)信息填在標本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi)，擰緊蓋，在容器上標明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標本，可以放在同一個二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(nèi)(或疫苗運輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，并密封，由專人(2人)運送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內(nèi)送達，則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標本。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩(wěn)定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
同位素核酸蛋白結(jié)合反應(yīng)試劑盒
凝膠遷移電泳分析試劑盒
核酸－蛋白結(jié)合凝膠電泳定量分析（McKay）試劑盒
3′端DNA轉(zhuǎn)移酶標記試劑盒
核酸蛋白結(jié)合反應(yīng)試劑盒
鮭魚精DNA DNA from salmon sperm 質(zhì)量規(guī)格：進分，Sigma31149,蛋白小于5% Mousethyroopin-releasinghormone,Helisa小鼠促甲狀釋放激素(H)elisa規(guī)格：96T/48T
5-氟脫氧胞苷 5-Fluoro-2'-deoxycytidine 質(zhì)量規(guī)格：98%,進分 小鼠抗受體(A)elisa ，英文名： A ELISA Kit
5-氟-2‘-脫氧尿苷;氟尿苷 5-Fluoro-2'--deoxyuridine 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 大鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA檢測試劑盒Ratthrombusprecursorprotein,TpPELISAKit 96T/48T
鳥苷;核苷 Guanosine 質(zhì)量規(guī)格：≥98%,細胞培養(yǎng)級 人乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)試劑盒 Human ChAT ELISA Kit
核苷(標準品) Guanosine 質(zhì)量規(guī)格：≥98%,標準品 RatPlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptorα,PDGFsR-αELISAKit大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)elisa規(guī)格：96T/48T
GDPNa2;5’-二鳥苷二鈉 GDP Di Salt 質(zhì)量規(guī)格：>90%,BR GST融合蛋白同位素([γ32P]GTP)標記試劑盒20
SU11274 SU-11274 質(zhì)量規(guī)格：>98%,選擇性的Met抑制劑 MouseThyroxineaibody,TAbelisa小鼠甲狀抗體(TAb)elisa規(guī)格：96T/48T
尿苷；核苷 Uridine 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR，可用于細胞培養(yǎng) 小鼠抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)elisa ，英文名： AT-Ⅲ ELISA Kit
核苷,尿苷(標準品) Uridine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品 大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA檢測試劑盒RaeceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISAKit 96T/48T
UTP;5‘-三尿苷三鈉 UTP, Tri Salt 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人氧化代謝物 試劑盒 Human Biopyrrin ELISA Kit
重組煙草蝕紋病毒蛋白酶苷松新酮 Nardosinone 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 小鼠抗肌蛋白(UN)elisa ，英文名： UN ELISA Kit
白花前胡乙素 Praeruptorin B 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)elisa ，英文名： EMA IgA ELISA Kit
白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ；蒼術(shù)內(nèi)酯II Atractylenolide II 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)ELISA檢測試劑盒Mouseai-EndomysialAibodyIgA,EMAIgAELISAKit 96T/48T
皂苷A Clinodiside A 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA檢測試劑盒Mouseai-Thyroid-Peroxidaseaibody,TPO-AbELISAKit 96T/48T
三白草酮 Sauchinone 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)elisa ，英文名： TPO-Ab ELISA Kit
大黃素-8-β-D-吡喃葡萄糖苷 Emodin-8-glucoside 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 小鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)elisa ，英文名： ATGA/TGAB ELISA Kit
異蓮心堿 Isoliensinine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA檢測試劑盒Mousetarate-resistaacidphosphatase5b,ACP-5bELISAKit 96T/48T
蓮心堿高氯酸鹽 Liensinine Perchlorate 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 小鼠抗抗體(AsAb)elisa ，英文名： AsAb ELISA Kit
丁烯基苯酞 3-Butylidenephthalide 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品川芎提取,液體 小鼠抗尿激素(ADH)elisa ，英文名： ADH ELISA Kit
茯苓酸 Pachymic acid 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 小鼠抗尿激素/血管加壓素/精加壓素(ADH/VP/AVP)ELISA檢測試劑盒Mouseaidiuretichormone/vasopressin/argininevasopressin,ADH/VP/AVPELISAKit 96T/48T
生物醫(yī)學實驗中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點，本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。
