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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |
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更新時(shí)間:2022-06-22 15:01:47瀏覽次數(shù):284
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操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
中文名稱:堿性磷酸酶活性檢測試劑盒
英文名稱:Alkaline Phosphatase Activity Detection Kit
產(chǎn)品規(guī)格:100T
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品貨號:BJ-F0165117
生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細(xì)小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來,此操作非常繁瑣,并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn),本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。
產(chǎn)品介紹:
本品為堿性磷酸酶活性檢測試劑盒,可快速、便捷地檢測細(xì)胞或組織裂解液/勻漿液、血清、血漿、尿液、純化酶等樣品中的ALP活性。該試劑盒包括標(biāo)準(zhǔn)品和空白對照,可進(jìn)行達(dá)100個(gè)樣品的檢測。 堿性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,簡寫為ALP或AKP),又稱堿性磷酸酯酶,是一組同工酶,目前已發(fā)現(xiàn)六種ALP1-ALP6。廣泛分布于人體、骨骼、腸、腎和胎盤等組織,是經(jīng)向外排出的一種酶。堿性條件下可催化磷酸酯鍵的水解,從而將底物分子上的磷酸基團(tuán)去除,轉(zhuǎn)化為羥基。此類底物包括核酸(DNA、RNA)、蛋白、生物堿等。常見的有腸道堿性磷酸酶、非組織特異性堿性磷酸酶、胎盤堿性磷酸酶等;生物學(xué)中堿性磷酸酶(ALP)水平的變化及其活性的高低常被作為一種檢測組織行為的指標(biāo),如:1)作為iPS成功誘導(dǎo)的標(biāo)志;ALP在大多數(shù)細(xì)胞類型中均有表達(dá),但是在iPS細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)水平明顯升高;2)結(jié)腸癌細(xì)胞分化程度定性和定量的指標(biāo);3)血清中堿性磷酸酯酶的升高可導(dǎo)致高堿性磷酸酶血癥,常被認(rèn)為和惡性管阻塞,原發(fā)性硬化管炎,肝癌,肝硬化等肝疾病密切相關(guān);4)血清中堿性磷酸酶活性升高還和骨骼損傷導(dǎo)致的骨生成,以及骨骼疾病如纖維骨炎、佝僂病、成骨不全等密切相關(guān);5)堿性磷酸酶水平也會(huì)出現(xiàn)一些病理性降低的情況,多見于重癥慢性腎炎、兒童甲狀腺機(jī)能不全、貧血等。對于正常成人來說,血清內(nèi)ALP的范圍為40-150U/L。 對磷酸(p-nitrophenyl phosphate, pNPP)是一種常用的磷酸酶顯色底物,堿性條件下,可在ALP作用下生成對酚(p-nitrophenol, pNP),后者在堿性環(huán)境下呈黃色產(chǎn)物,并在405nm處可檢測到大吸收峰。產(chǎn)物黃色越深,說明ALP活性越高,反之則活性越低。因此,通過檢測OD405吸光值即可計(jì)算ALP活性水平。 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期一年。 |
使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時(shí)間、編號、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上,連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本,可以放在同一個(gè)二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專人(2人)運(yùn)送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá),則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的,需在4℃冰箱短時(shí)間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃~-40℃時(shí)不穩(wěn)定,故長期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
微型RNA(miRNA)文庫構(gòu)建技術(shù)服務(wù)
特定微型RNA目標(biāo)基因探測技術(shù)服務(wù)
微型RNA文庫數(shù)據(jù)庫(在建)
核酸電泳試劑專題
同位素法DNA南方雜交印跡試劑盒
1,2,3,4-四氫萘(THN)(Standard for GC, ≥99.5% (GC)) 1,2,3,4-Tetrahydronaphthalene 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC, ≥99.5% (GC) ELISAKitLipase人脂肪酶規(guī)格:48T/96T
三乙酯(TEP)(Standard for GC,>99.7%(GC)) Triethyl phosphate 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,>99.7%(GC) 小鼠0脂酶A2(PL-A2)elisa ,英文名: PL-A2 ELISA Kit
十三烷(Standard for GC,>99%(GC)) Tridecane 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,>99%(GC) 大鼠雌二醇受體(ER)ELISA檢測試劑盒ratEsadiolreceptor,ERELISAKit 96T/48T
十四醇(Standard for GC, ≥99.5% (GC)) 1-Tetradecanol 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC, ≥99.5% (GC) 人調(diào)寧蛋白-1(CNN1)試劑盒 Human Calponin-1,CNN1 ELISA Kit
十一烷(standard for GC,≥99.5%(GC)) Undecane 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,≥99.5%(GC) RatN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISAKit大鼠N-乙?;?/span>-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯(AcSDKP)elisa規(guī)格:96T/48T
十一酸(Standard for GC,≥99.0%(GC)) Undecanoic acid 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.0%(GC) D-蘋果酸待測樣品處理試劑盒20
甲基壬基甲酮(Standard for GC,≥99.5%(GC)) 2-Undecanone 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5%(GC) MouseproteinkinaseB,PKBelisa小鼠蛋白B(PKB)elisa規(guī)格:96T/48T
順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品) cis-4,7,10,13,16,19-Docosahexaenoic acid methyl ester 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠0脂酶A2(PL-A2)ELISA 試劑盒
順式-5,8,11,14,17-二十碳五烯酸(標(biāo)準(zhǔn)品) cis-5,8,11,14,17-Eicosapentaenoic acid 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 The rat cellar protein Caveolin1 (Cav-1) ELISA Kit 大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)elisa
Celite 硅藻土 545(助濾劑,碳酸鈉處理,通量煅燒) Celite 545 質(zhì)量規(guī)格:助濾劑,碳酸鈉處理,通量煅燒 HumanElastinELISAKit 人彈性蛋白(Elastin)elisa 96T/48T 進(jìn)口分裝
堿性磷酸酶活性檢測試劑盒甲基立枯磷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%) Tolclofos-methyl 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98% 人B細(xì)胞受體(BCR)ELISA檢測試劑盒HumanBcellreceptor,BCRELISAKit 96T/48T
殺蟲單 Thiosultap di 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 人cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)ELISA檢測試劑盒HumanCyclicAMPresponseelemebindingprotein,CREBELISAKit 96T/48T
綠草定 Triclopyr 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 人CCAAT增子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)ELISA檢測試劑盒HumanCCAAT/enhancerbindingproteinalpha,C/EBPαELISAKit 96T/48T
雙硫磷 Temephos 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 人CCAAT增子結(jié)合蛋白β(C/EBPβ)ELISA檢測試劑盒HumanCCAAT/enhancerbindingproteinbeta,C/EBPβELISAKit 96T/48T
氟樂靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=5%) Trifluralin solution 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=5% 人CCAAT增子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA檢測試劑盒HumanCCAAT/enhancerbindingproteindeta,C/EBPδELISAKit 96T/48T
殺蟲脲 Triflumuron 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 人CCAAT增子結(jié)合蛋白ε(C/EBPε)ELISA檢測試劑盒HumanCCAAT/enhancerbindingproteinepsilon,C/EBPεELISAKit 96T/48T
戊菌隆(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%) Pencycuron 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5% 人DNA結(jié)合蛋白(DBP)ELISA檢測試劑盒HumanDNABindingProtein,DBPELISAKit 96T/48T
噻螨酮標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=3%) Hexythiazox solution 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=3% 人EJ抗體/抗甘氨酰NA合成酶抗體(EJ/GlyRS)ELISA檢測試劑盒Humanai-EJ-aibody,EJ/GlyRSELISAKit 96T/48T
噻螨酮標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=6%) Hexythiazox solution 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=6% 人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA檢測試劑盒HumanICEprotease-activatingfactor,IRAPELISAKit 96T/48T
抑霉唑標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=2%) Imazalil solution 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=2% 人L苯解氨酶(PAL)ELISA檢測試劑盒HumanL-Phenylalanineammonla-lyase,PALELISAKit 96T/48T
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。