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上海邦景實業(yè)有限公司

主營產(chǎn)品： 進口elisa試劑盒，細胞株，細胞系，菌種

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公司信息

上海邦景實業(yè)有限公司

聯(lián)系人：: 劉小姐

電話：: 021-52960952

手機：: 15000017673

售后電話：: 15000017673

傳真：: 021-57690166

地址：: 上海市閔行區(qū)碧泉路36弄銀宵大廈

郵編：: 200000

網(wǎng)址：: www.bhsy-e.com/

商鋪：: http://m.hg1112.cn/st582730/

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組織蛋白抽提試劑盒

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具體成交價以合同協(xié)議為準

型號
品牌 其他品牌
廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
所在地 上海市

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更新時間：2022-06-15 15:37:50瀏覽次數(shù)：302

聯(lián)系我們時請說明是環(huán)保在線上看到的信息，謝謝!

【簡單介紹】

編號	BJ-F0164878

組織蛋白抽提試劑盒及公司其它各類產(chǎn)品：主動脈內(nèi)皮細胞HAEC
FAM3D Others Human FAM3D 細胞裂解液 (陽性對照)
HSCT6 大鼠肝星狀細胞
CM-R003大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
KM3, 多發(fā)性骨髓瘤細胞
細胞腦微血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

中文名稱：組織蛋白抽提試劑盒
英文名稱：Tissue Protein Extraction Kit
產(chǎn)品規(guī)格：25次|100次
發(fā)貨周期：1～3天
產(chǎn)品貨號：BJ-F0164878
生物醫(yī)學實驗中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點，本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。產(chǎn)品介紹：

本試劑盒應用于組織樣本的總蛋白提取。提取蛋白之前可根據(jù)具體實驗需要加入蛋白酶抑制劑、鹽、還原劑、螯合劑等成分。使用該提取液提取的組織蛋白，可進行蛋白活性分析、免疫檢測、蛋白純化等下游操作，并可采用BCA、Bradford、Lowry法進行蛋白定量。試劑盒中帶有蛋白酶抑制劑混合物，可有效避免蛋白提取過程中蛋白的降解。

試劑盒組成：

組份 25次

Tissue Protein Extraction Reagent 25ml

Protease Inhibitor Cocktail 250μl

保存條件：Protease Inhibitor Cocktail：-20℃，其它組分：室溫

注意事項：

1、本產(chǎn)品適用于提取心肌、骨骼肌、腎臟、前列腺、皮膚、結(jié)腸、等軟組織。

2、為防止蛋白降解，所有的操作盡量在冰上進行。

3、使用本產(chǎn)品提取蛋白后，可采用BCA、Bradford、Lowry法進行蛋白定量。

4、為了獲得實驗佳效果，請根據(jù)實驗調(diào)整佳使用量。

使用方法：

1、請在實驗前取出Tissue Protein Extraction Reagent進行預冷。

2、取適量Tissue Protein Extraction Reagent，抽提蛋白2-3分鐘按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail，即1×工作液。

3、1 g組織加入10ml 1×工作液勻漿處理(抽提試劑的使用量可根據(jù)組織不同而調(diào)整)。若需要濃縮的蛋白提取物，可適當減少組織蛋白抽提試劑使用量。

4、冰上孵育20分鐘(冰上放置時間可根據(jù)組織不同而調(diào)整)。

5、10000×g 離心15-20分鐘。

6、轉(zhuǎn)移上清至新管中，進行下一步的蛋白含量測定、純化及分析。

儲存條件：-20℃

使用方法：本產(chǎn)品僅用于科研
注意：標本采集人員需按有關規(guī)定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封；每袋裝一份標本。同時也將標本有關信息填在標本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi)，擰緊蓋，在容器上標明有關信息。同一患者2份以上的密封標本，可以放在同一個二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(nèi)(或疫苗運輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，并密封，由專人(2人)運送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內(nèi)送達，則應盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標本。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩(wěn)定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。

注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。