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更新時間:2018-06-11 20:44:59瀏覽次數(shù):228次
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你土壤和湖海沉積物中都含有棕黑色或黑色的腐殖酸,它們對PCR等后續(xù)反應(yīng)有極大的抑制作用,所以有效去除土壤中腐殖酸是提取土壤微生物DNA的重要環(huán)節(jié)。但是目前市場上沒有專門的產(chǎn)品,針對這一情況,LMAI Bio開發(fā)了本產(chǎn)品,專門用于對提取DNA用的土壤進(jìn)行預(yù)處理,以清除腐殖酸成分。
1. 清除效果好,一次能使腐殖酸的濃度降低50%左右。
土壤腐殖酸清除劑
名稱 | 規(guī)格 | 價格 | 手冊 |
土壤腐殖酸清除劑 | 250 mL | 690元 |
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土壤和湖海沉積物中都含有棕黑色或黑色的腐殖酸,它們對PCR等后續(xù)反應(yīng)有極大的抑制作用,所以有效去除土壤中腐殖酸是提取土壤微生物DNA的重要環(huán)節(jié)。但是目前市場上沒有專門的產(chǎn)品,針對這一情況,LMAI Bio開發(fā)了本產(chǎn)品,專門用于對提取DNA用的土壤進(jìn)行預(yù)處理,以清除腐殖酸成分。
1. 清除效果好,一次能使腐殖酸的濃度降低50%左右。
2. 適合于黃色、紅色、黑色和棕黑色等各種質(zhì)地的土壤和河海沉積物。
3. 操作過程簡單快速,一次處理只需要10分鐘。
4. 擴(kuò)容性好,可小規(guī)模操作,也可以大規(guī)模操作。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相,離心后可形成水相層和有機(jī)層,這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時,變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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