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柱式動(dòng)物DNAout

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

柱式動(dòng)物DNAout本產(chǎn)品在LMAI Bio動(dòng)物DNAOUT(CAT#:3670)基礎(chǔ)上改良而得的柱式升級(jí)產(chǎn)品,主要用于快速提取新鮮或冷凍的動(dòng)物組織中的基因組DNA。跟動(dòng)物DNAOUT相比,它具有下列特點(diǎn):
1. DNA更加純凈,大多數(shù)DNA樣品的OD260/280值在1.8-1.9之間,無(wú)可見的RNA污染,可直接用于PCR、酶切、雜交等后續(xù)反應(yīng),DNA產(chǎn)率為0.5-2 mg/g。

詳細(xì)介紹

 

柱式動(dòng)物DNAout

名稱

規(guī)格

價(jià)格

手冊(cè)

柱式動(dòng)物DNAout

50次

690元

 

本產(chǎn)品在LMAI Bio動(dòng)物DNAOUT(CAT#:3670)基礎(chǔ)上改良而得的柱式升級(jí)產(chǎn)品,主要用于快速提取新鮮或冷凍的動(dòng)物組織中的基因組DNA。跟動(dòng)物DNAOUT相比,它具有下列特點(diǎn):
1. DNA更加純凈,大多數(shù)DNA樣品的OD260/280值在1.8-1.9之間,無(wú)可見的RNA污染,可直接用于PCR、酶切、雜交等后續(xù)反應(yīng),DNA產(chǎn)率為0.5-2 mg/g。
2. 操作更加簡(jiǎn)單,離心吸附操作代替離心沉淀,整個(gè)過(guò)程室溫操作約10分鐘,適合大規(guī)模樣品處理。
3. 安全無(wú)毒,本試劑盒對(duì)人體無(wú)毒,無(wú)腐蝕性和刺激性氣味。
4. 性價(jià)比高,質(zhì)量和國(guó)外同類產(chǎn)品相當(dāng),但價(jià)格更便宜。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí),它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相,離心后可形成水相層和有機(jī)層,這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無(wú)色)主要為RNA,有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí),變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來(lái)的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過(guò)離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來(lái)而被除去。
相關(guān)產(chǎn)品列表:
Tricine-SDS Sample Buffer,2X), non reducing 
Tricine-SDS Sample Buffer,2X), reducing 
Tris Buffered Saline(TBS),10X 
Tris Buffered Saline(TBS),10X 
Tris Buffered Saline(TBS),10X),pH8.0 
Tris Buffered Saline(TBS),10X,high salt) 
Tris Buffered Saline(TBS),10X,low salt) 
Tris Buffered Saline(TBS),10X,pH7.4 
Tris Buffered Saline(TBS),10X,pH7.6 
Tris Buffered Saline(TBS),10X,pH7.6 


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