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上海聯(lián)邁生物工程有限公司
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所 在 地上海市
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更新時間：2018-06-11 20:46:28瀏覽次數(shù)：451次
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磁珠動物DNAout本產(chǎn)品是利用磁珠的方法專門用于提取動物組織基因組DNA的試劑盒，所含生物磁珠是一種新型的功能化固體載體，其表面包被有活性基團，可以與多種生物活性物質(zhì)發(fā)生偶聯(lián)，兼具有液體的流動性和固體磁性材料等特點，在外磁場的作用下可以定向移動和集中，當撤去外磁場后，稍加振蕩或抽吸又可均勻分散于液體中，從而使固液相的分離變的十分快捷方便，通過簡單的洗脫可以得到純度很高的目的物質(zhì)。 本試劑盒所含磁
磁珠動物DNAout
名稱 | 規(guī)格 | 價格 | 手冊 |
磁珠動物DNAout | 50支 | 詢價 |
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本產(chǎn)品是利用磁珠的方法專門用于提取動物組織基因組DNA的試劑盒，所含生物磁珠是一種新型的功能化固體載體，其表面包被有活性基團，可以與多種生物活性物質(zhì)發(fā)生偶聯(lián)，兼具有液體的流動性和固體磁性材料等特點，在外磁場的作用下可以定向移動和集中，當撤去外磁場后，稍加振蕩或抽吸又可均勻分散于液體中，從而使固液相的分離變的十分快捷方便，通過簡單的洗脫可以得到純度很高的目的物質(zhì)。 本試劑盒所含磁珠微?？梢蕴禺惖匚紻NA，通過洗滌，去除DNA以外的RNA、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，從而達到分離純化DNA的目的。它具有下列特點：
1. 快速簡捷，一般可在36分鐘內(nèi)完成。
2. 所得DNA純度高， OD260/OD280一般達1.7-1.9。
3. DNA得率高，使用100 uL磁珠微粒，產(chǎn)率為8-30ug/10mg。
4. 長度可達20kb - 50kb，可直接用于PCR、Southern-blot和各種酶切反應。
5. 不使用有毒的苯酚等試劑，也不需要乙醇沉淀等步驟，而且省去了離心步驟。
6. 性價比高，質(zhì)量與進口試劑盒相當，但價格更便宜。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結(jié)合的技術。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時，變性的質(zhì)粒DNA又恢復原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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