重組人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白 Human PTHrP 100-09
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更新時間:2018-06-11 21:16:06瀏覽次數(shù):269次
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柱式水樣DNAout從水體中提取高純度的基因組DNA是水體環(huán)境監(jiān)測非常重要的手段,但是由于水體樣品存在腐殖酸、金屬離子等PCR抑制劑,從水樣中提取DNA一直比較棘手。為解決此問題,本公司利用在核酸純化領(lǐng)域的豐富經(jīng)驗和*的純化技術(shù)開發(fā)了本產(chǎn)品,它具有下列特點:
1. 操作簡單,整個過程不到30分鐘。
柱式水樣DNAout
名稱 | 規(guī)格 | 價格 | 手冊 |
柱式水樣DNAout | 50次 | 11900元 |
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從水體中提取高純度的基因組DNA是水體環(huán)境監(jiān)測非常重要的手段,但是由于水體樣品存在腐殖酸、金屬離子等PCR抑制劑,從水樣中提取DNA一直比較棘手。為解決此問題,本公司利用在核酸純化領(lǐng)域的豐富經(jīng)驗和*的純化技術(shù)開發(fā)了本產(chǎn)品,它具有下列特點:
1. 操作簡單,整個過程不到30分鐘。
2. 采用機械破碎法破碎細胞,能高效回收水體各種大小微生物的基因組DNA,包
括細菌,真菌DNA,藻類和其他浮游生物,但產(chǎn)率隨水樣微生物豐富程度不同
而不同。
3. 采用柱式法純化DNA,得到的DNA純度高,可直接用于PCR、酶切、雜交等實
驗。
4. 如果跟濾膜過濾濃縮結(jié)合使用,每次提取可以處理數(shù)升的水樣。
5. 價廉物美,與國外同類產(chǎn)品相比質(zhì)量相當(dāng),但價格便宜。
6. 安全無毒,本試劑盒對人體無害,無腐蝕性和刺激性氣味。
7. 適用于自來水,湖水,河水,生活污水,礦山廢水等樣品。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時,變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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