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更新時(shí)間：2018-06-11 21:12:43瀏覽次數(shù)：275次
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柱式腐殖酸清除劑用絕大多數(shù)文獻(xiàn)報(bào)道的方法從土壤或湖海沉積物中提取的DNA都含有棕黑色或黑色的腐殖酸的污染，而腐殖酸對(duì)PCR等后續(xù)反應(yīng)有極大的抑制作用。本產(chǎn)品從LMAI Bio柱式DNABACK改進(jìn)而得，專門(mén)用于從土壤DNA樣品中清除腐殖酸污染。
1. 去污染效果好，能使腐殖酸的濃度降低10倍以上。
柱式腐殖酸清除劑
名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格 | 手冊(cè) |
柱式腐殖酸清除劑 | 30次 | 990元 |
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用絕大多數(shù)文獻(xiàn)報(bào)道的方法從土壤或湖海沉積物中提取的DNA都含有棕黑色或黑色的腐殖酸的污染，而腐殖酸對(duì)PCR等后續(xù)反應(yīng)有極大的抑制作用。本產(chǎn)品從LMAI Bio柱式DNABACK改進(jìn)而得，專門(mén)用于從土壤DNA樣品中清除腐殖酸污染。
1. 去污染效果好，能使腐殖酸的濃度降低10倍以上。
2. DNA回收率高，一般都在80%以上。
3. 操作過(guò)程簡(jiǎn)單快速，只需要10分鐘。
4. 擴(kuò)容性好，可小規(guī)模操作，也可以大規(guī)模操作。
5. 處理后的樣品原液或稍微稀釋后即可用于PCR。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí)，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，離心后可形成水相層和有機(jī)層，這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開(kāi)。水相層(無(wú)色)主要為RNA，有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開(kāi)而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí)，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來(lái)的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過(guò)離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來(lái)而被除去。
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