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柱式BAC DNAout

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更新時間:2018-06-11 21:04:05瀏覽次數(shù):199次

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產(chǎn)品簡介

柱式BAC DNAout 一般而言,使用硅膠柱純化質(zhì)粒時,只能純化小于30 Kb以下的質(zhì)粒載體,大于30 Kb質(zhì)粒因牢牢結(jié)合在硅膠基質(zhì)中,會導致質(zhì)粒產(chǎn)量大大降低。本產(chǎn)品對本公司的柱式質(zhì)粒提取試劑盒進行優(yōu)化而得,它采用了改良的細菌裂解和質(zhì)粒DNA上柱條件,確保大型的質(zhì)粒(大至100 Kb的質(zhì)粒)能有效地結(jié)合到硅膠柱中,并可高效地洗脫出來。1. 適用于不超過100 Kb的大型質(zhì)粒DNA,包括BAC、P

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柱式BAC DNAout 

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柱式BAC DNAout 

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詢價

 

一般而言,使用硅膠柱純化質(zhì)粒時,只能純化小于30 Kb以下的質(zhì)粒載體,大于30 Kb質(zhì)粒因牢牢結(jié)合在硅膠基質(zhì)中,會導致質(zhì)粒產(chǎn)量大大降低。本產(chǎn)品對本公司的柱式質(zhì)粒提取試劑盒進行優(yōu)化而得,它采用了改良的細菌裂解和質(zhì)粒DNA上柱條件,確保大型的質(zhì)粒(大至100 Kb的質(zhì)粒)能有效地結(jié)合到硅膠柱中,并可高效地洗脫出來。1. 適用于不超過100 Kb的大型質(zhì)粒DNA,包括BAC、PAC、P1和Cosmid 等。如果超過100 Kb,建議使用沉淀法或離子交換法。
2. 可從1.5-5.0 mL 細菌培養(yǎng)液中純化1 μg左右大型質(zhì)粒DNA。
3. 安全,無酚氯等危險的有機物抽提。
4. 柱式操作,比經(jīng)典的沉淀法操作簡單,重復性好,每次都能獲得理想效果。
5. 得到的DNA更純凈,可以直接用于PCR、酶切和測序,不需要再純化。
6. *,性價比高。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相, 離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結(jié)合的技術。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離,當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時,變性的質(zhì)粒DNA又恢復原來的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
 相關產(chǎn)品列表:
Bovine Serum Albumin Solution(BSA溶液),20mg/mL
BSA Blocking Buffer in PBS 
BSA Blocking Buffer in PBS with azide 
BSA Blocking Buffer in PBS with Tween-20 
BSA Blocking Buffer in TBS 
BSA Blocking Buffer in TBS with azide 
BSA Blocking Buffer in TBS with Tween-20 
Calcium Acetate Solution(乙酸鈣溶液),0.2M 
Calcium Chloride Solution(化鈣溶液), 1M
CAPS Buffer,0.5M,pH10.0 
CAPS Buffer,0.5M,pH10.5 


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