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大提柱式質(zhì)粒 DNAout

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品       牌

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所  在  地上海市

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更新時(shí)間:2018-06-11 21:05:41瀏覽次數(shù):363次

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產(chǎn)品簡介

大提柱式質(zhì)粒 DNAout 本試劑盒是用于質(zhì)粒DNA大量制備與純化的試劑盒。菌體先經(jīng)堿裂解法處理,再通過離心吸附柱,專一結(jié)合DNA,后洗去雜質(zhì),高效快速提取質(zhì)粒DNA,全套操作可以在30分鐘之內(nèi)完成。使用本試劑盒可從50-100 mL過夜培養(yǎng)的菌液純化得到高達(dá)300-500 μg的高純度質(zhì)粒DNA(OD260/OD280=1.8-2.0),可以直接用于酶切、轉(zhuǎn)化、測(cè)序及PCR等。
1. 快速、步

詳細(xì)介紹

 

大提柱式質(zhì)粒 DNAout 

名稱

規(guī)格

價(jià)格

手冊(cè)

大提柱式質(zhì)粒 DNAout 

5次

290元

 

本試劑盒是用于質(zhì)粒DNA大量制備與純化的試劑盒。菌體先經(jīng)堿裂解法處理,再通過離心吸附柱,專一結(jié)合DNA,后洗去雜質(zhì),高效快速提取質(zhì)粒DNA,全套操作可以在30分鐘之內(nèi)完成。使用本試劑盒可從50-100 mL過夜培養(yǎng)的菌液純化得到高達(dá)300-500 μg的高純度質(zhì)粒DNA(OD260/OD280=1.8-2.0),可以直接用于酶切、轉(zhuǎn)化、測(cè)序及PCR等。
1. 快速、步驟少,整個(gè)操作在半個(gè)小時(shí)之內(nèi)完成。
2. 離心柱大吸附量為500 μg,100mL高拷貝的菌液一般能得到700 μg左右的質(zhì)粒DNA,100 mL低拷貝的菌液一般能得到150-350 μg質(zhì)粒DNA。
3. 純度高,采用本試劑盒提取的質(zhì)粒OD比值在1.8-2.0之間。
4. 產(chǎn)量高, 每毫升過夜培養(yǎng)的細(xì)菌可以提取到2-5 μg/mL。
5. 用途廣,適用于低拷貝和高拷貝質(zhì)粒。
6. 價(jià)格低,比多數(shù)國內(nèi)同類產(chǎn)品的價(jià)格更便宜。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí),它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相, 離心后可形成水相層和有機(jī)層,這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí),變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
 相關(guān)產(chǎn)品列表:
Anticoagulant CPDA-1 Solution(抗凝劑CPDA-1) 
Anticoagulant EDTA Solution(抗凝劑EDTA)
Antigen Retrieval Reagent,5X
ATP Solution(ATP溶液),100mM
BES Buffer,0.5M,pH6.0 
BES Buffer,0.5M,pH6.5 
BES Buffer,0.5M,pH7.0  
BES Buffer,0.5M,pH7.4  
BES Buffered Saline,2X 


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