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一步法96孔板質(zhì)粒DNAout(離心法)

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更新時(shí)間:2018-06-11 21:07:43瀏覽次數(shù):284次

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產(chǎn)品簡介

一步法96孔板質(zhì)粒DNAout(離心法)本產(chǎn)品是基于聯(lián)邁基因革命性的一步法質(zhì)粒DNA提取技術(shù)開發(fā)的高通量產(chǎn)品,只需要一種溶液瞬間即可以完成細(xì)菌裂解,并且裂解物可以直接上柱純化質(zhì)粒DNA。它比經(jīng)典的堿變性質(zhì)粒制備方法更加快捷和方便。本產(chǎn)品的主要特點(diǎn)是:
1. 超快, 整個(gè)質(zhì)粒DNA提取過程只需要不到10分鐘,比傳統(tǒng)的堿變性方法快捷。
2. 回收率高,可以用單個(gè)菌落提取質(zhì)粒,產(chǎn)量一般在3-5ug/mL

詳細(xì)介紹

 

一步法96孔板質(zhì)粒DNAout(離心法)

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一步法96孔板質(zhì)粒DNAout(離心法)

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本產(chǎn)品是基于聯(lián)邁基因革命性的一步法質(zhì)粒DNA提取技術(shù)開發(fā)的高通量產(chǎn)品,只需要一種溶液瞬間即可以完成細(xì)菌裂解,并且裂解物可以直接上柱純化質(zhì)粒DNA。它比經(jīng)典的堿變性質(zhì)粒制備方法更加快捷和方便。本產(chǎn)品的主要特點(diǎn)是:
1. 超快, 整個(gè)質(zhì)粒DNA提取過程只需要不到10分鐘,比傳統(tǒng)的堿變性方法快捷。
2. 回收率高,可以用單個(gè)菌落提取質(zhì)粒,產(chǎn)量一般在3-5ug/mL飽和菌液。
3. DNA無損傷,使用聯(lián)邁基因一步式裂解細(xì)菌技術(shù),避免了強(qiáng)堿對DNA的損害。 
4. DNA純度高,幾乎沒有基因組DNA和RNA污染,OD260/280一般在1.7-1.9之間。
5. DNA可以直接用于電泳、酶切、PCR、細(xì)菌轉(zhuǎn)化、分子克隆等實(shí)驗(yàn)。
6. 重復(fù)性和穩(wěn)定性好。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí),它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相,離心后可形成水相層和有機(jī)層,這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí),變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
相關(guān)產(chǎn)品列表:
pBlueScriptR PEX5L
pBlueScriptR PPP2R1B
pBlueScriptR PPP2R2 C
ACES Buffer,0.5M,pH6.0 
ACES Buffer,0.5M,pH6.5 
ACES Buffer,0.5M,pH7.0 
ACES Buffer,0.5M,pH7.4 
Acetate Buffer(乙酸緩沖液),1M,pH3.0  
Acetate Buffer(乙酸緩沖液),1M,pH3.5  
Acetate Buffer(乙酸緩沖液),1M,pH4.0  


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