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上海聯(lián)邁生物工程有限公司
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所 在 地上海市
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更新時間：2018-06-11 21:15:23瀏覽次數(shù)：472次
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酸洗玻璃珠（直徑：200μm）本產(chǎn)品是用濃酸充分洗滌后的玻璃珠，它是玻璃珠法破碎細(xì)菌和真菌的*成分，主要用于從具有堅硬外壁的微生物細(xì)胞（如真菌孢子、酵母細(xì)胞、結(jié)核細(xì)胞等）中提取DNA、RNA和蛋白質(zhì)大分子，因為用其他方法，包括酶解方法都很難沉底破碎具有堅硬外壁的微生物細(xì)胞。本產(chǎn)品具有下列特點：
1. 經(jīng)過充分的酸洗，免去用戶接觸具有腐蝕性的濃酸。
酸洗玻璃珠(直徑：200μm)
名稱 | 規(guī)格 | 價格 | 手冊 |
酸洗玻璃珠(直徑：200μm) | 10g | 詢價 |
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本產(chǎn)品是用濃酸充分洗滌后的玻璃珠，它是玻璃珠法破碎細(xì)菌和真菌的*成分，主要用于從具有堅硬外壁的微生物細(xì)胞（如真菌孢子、酵母細(xì)胞、結(jié)核細(xì)胞等）中提取DNA、RNA和蛋白質(zhì)大分子，因為用其他方法，包括酶解方法都很難沉底破碎具有堅硬外壁的微生物細(xì)胞。本產(chǎn)品具有下列特點：
1. 經(jīng)過充分的酸洗，免去用戶接觸具有腐蝕性的濃酸。
2. 用本產(chǎn)品破碎具有堅硬外壁的微生物細(xì)胞，屬于物理方法，不但比溫和的化學(xué)破壁法普適性更好、重復(fù)性更好，同時不需要使用酶，因此不容易被酶中的外源核酸或蛋白質(zhì)污染。
3. 用玻璃珠破碎法提取酸洗玻璃珠(直徑：200μm)一個樣品只需要10余分鐘時間，非?？旖?。注意：本產(chǎn)品需要跟本公司提供的裂解液、上柱液、離心吸附柱等配合使用才能用于核酸純化。
4. 一次可以處理5 mL的微生物樣品。
5. 本系列產(chǎn)品有各種規(guī)格、適用于不同材料。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，酸洗玻璃珠(直徑：200μm)離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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