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行業(yè)產(chǎn)品
上海聯(lián)邁生物工程有限公司
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所 在 地上海市
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更新時間:2018-06-12 11:59:18瀏覽次數(shù):315次
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超快核酸電泳液干粉 本產(chǎn)品是聯(lián)邁基因在超快DNA電泳液SuperBuffer的基礎(chǔ)上開發(fā)出的又一新產(chǎn)品。它既可用于DNA的快速電泳(取代傳統(tǒng)的TBE和TAE 電泳緩沖液),又能用于RNA的快速電泳(取代MOPS/甲醛電泳液)。它不但能大大縮短DNA和RNA電泳的時間,還使DNA膠回收率比TAE和TBE膠高2-3倍。使用本產(chǎn)品,實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)備工作更加簡單,再也不需要準(zhǔn)備多種緩沖液。
1. 快速,用以較高
超快核酸電泳液干粉
名稱 | 規(guī)格 | 價格 | 手冊 |
超快核酸電泳液干粉 | 20L | 詢價 |
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本產(chǎn)品是聯(lián)邁基因在超快DNA電泳液SuperBuffer的基礎(chǔ)上開發(fā)出的又一新產(chǎn)品。它既可用于DNA的快速電泳(取代傳統(tǒng)的TBE和TAE 電泳緩沖液),又能用于RNA的快速電泳(取代MOPS/甲醛電泳液)。它不但能大大縮短DNA和RNA電泳的時間,還使DNA膠回收率比TAE和TBE膠高2-3倍。使用本產(chǎn)品,實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)備工作更加簡單,再也不需要準(zhǔn)備多種緩沖液。
1. 快速,用以較高電壓電泳DNA和RNA電泳時,比常規(guī)電泳緩沖液高2-5倍(當(dāng)然,也可以使用跟常規(guī)TBE、TAE和MOPS一樣的電壓進(jìn)行電泳)。一般DNA電泳檢測(如PCR檢測)只需要5-10分鐘即可。
2. 瓊脂糖用量少(一般電泳用0.6-0.8%瓊脂糖即可),節(jié)約成本。
3. DNA膠回收率是TAE和TEB膠回收率的2-3倍,總回收率為80-90%(對1 kb左右的DNA片段)。
4. 方便,加水即用。既適用于DNA,又適用于RNA,在同一塊凝膠上可以同時電泳DNA和RNA兩種不同的核酸,再也不需要預(yù)配多種緩沖液。
5. 對鹽離子的耐受能力比SuperBuffer更強(qiáng),含鹽反應(yīng)液(如PCR,酶切DNA產(chǎn)物等)也能直接電泳并得到很好的分辨率,不需要脫鹽處理。
6. 由于組成成分不含氨基,故可以使用DEPC處理以去除RNase(Tris 和MOPS由于含氨基,故不能用DEPC直接進(jìn)行RNase滅活處理)。
7. 價格跟市場上的TAE、TBE和MOPS預(yù)配液相當(dāng)。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相, 離心后可形成水相層和有機(jī)層,這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時,變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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