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通用型全基因組擴增試劑盒

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更新時間：2018-06-13 14:57:01瀏覽次數(shù)：247次

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產(chǎn)品簡介

通用型全基因組擴增試劑盒本產(chǎn)品是用于基因組DNA擴增（whole genome amplification,WGA）的試劑盒，可以方便、簡單、快速、經(jīng)濟的得到穩(wěn)定產(chǎn)量的基因組DNA擴增樣品。WGA是基于phi29 DNA聚合酶和隨機引物的一種恒溫擴增基因組的技術，本產(chǎn)品有如下優(yōu)點：

詳細介紹

通用型全基因組擴增試劑盒

名稱	規(guī)格	價格	手冊
通用型全基因組擴增試劑盒	25次	1700元

本產(chǎn)品是用于基因組DNA擴增（whole genome amplification,WGA)的試劑盒，可以方便、簡單、快速、經(jīng)濟的得到穩(wěn)定產(chǎn)量的基因組DNA擴增樣品。WGA是基于phi29 DNA聚合酶和隨機引物的一種恒溫擴增基因組的技術，本產(chǎn)品有如下優(yōu)點：

1．即開即用，不需要單獨準備所需試劑。

2．可以擴增基因組達上萬倍。

3．具有高產(chǎn)量和高保真性的特點。

4．可使用各種來源的樣品，包括全血、干血、發(fā)根、口腔粘膜刮液、培養(yǎng)細胞、真菌、病毒等。

5．操作簡便快捷，整個過程不需要PCR儀。

6．產(chǎn)物可用于多種后續(xù)試驗，包括多重PCR、長片斷PCR、定量PCR、克隆、文庫構建、單倍型分析、測序、基因芯片分析、各種遺傳分析（片段差異、微衛(wèi)星差異、SNP、STR）等。

RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結構解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時，變性的質(zhì)粒DNA又恢復原來的構型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網(wǎng)狀結構，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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