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*0化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

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產(chǎn)品型號(hào)

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所  在  地上海市

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產(chǎn)品簡介

*0化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞本產(chǎn)品是采用大腸桿菌*0菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞,可用于DNA 的化學(xué)轉(zhuǎn)化。該菌株是一種用于鋪制與培養(yǎng)質(zhì)粒平板和粘粒平板的重級(jí)缺陷的抑制型株,其φ80lacZΔM15基因產(chǎn)物可與載體編碼的β-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)α 互補(bǔ),可用于藍(lán)白斑篩選。使用pUC19質(zhì)粒檢測(cè),轉(zhuǎn)化效率可達(dá)108。本感受態(tài)細(xì)胞具有鏈霉素抗性。
菌株的基因型:F- mcrA Δ(mrr-hs

詳細(xì)介紹

 

*0化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

名稱

規(guī)格

價(jià)格

手冊(cè)

*0化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

0.1mL×10

詢價(jià)

 

本產(chǎn)品是采用大腸桿菌*0菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞,可用于DNA 的化學(xué)轉(zhuǎn)化。該菌株是一種用于鋪制與培養(yǎng)質(zhì)粒平板和粘粒平板的重級(jí)缺陷的抑制型株,其φ80lacZΔM15基因產(chǎn)物可與載體編碼的β-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)α 互補(bǔ),可用于藍(lán)白斑篩選。使用pUC19質(zhì)粒檢測(cè),轉(zhuǎn)化效率可達(dá)108。本感受態(tài)細(xì)胞具有鏈霉素抗性。菌株的基因型:F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 lacZΔM15Δ lacX74 recA1 araΔ139Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL(Strr) endA1 nupG

RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí),它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相,離心后可形成水相層和有機(jī)層,這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí),變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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