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上海聯(lián)邁生物工程有限公司
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更新時間：2018-06-19 15:28:47瀏覽次數(shù)：650次
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DOP-PCR試劑盒DOP-PCR即Degenerated Oligonucleotide Primed PCR（簡并寡核苷酸引物聚合酶鏈反應(yīng)），它與普通PCR的區(qū)別在于其使用單一的半簡并引物和低復(fù)性溫度，半簡并引物由特定序列+簡并序列+特定序列三部分組成，因此沒有種屬特異性，也跟DNA的復(fù)雜性無關(guān)，能均勻地擴增真?zhèn)€基因組，尤其適用于痕量DNA樣品的擴增。本產(chǎn)品是在經(jīng)典DOP-PCR基礎(chǔ)上經(jīng)過精心
DOP-PCR試劑盒
名稱 | 規(guī)格 | 價格 | 手冊 |
DOP-PCR試劑盒 | 50次 | 1680元 |
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DOP-PCR即Degenerated Oligonucleotide Primed PCR（簡并寡核苷酸引物聚合酶鏈反應(yīng)），它與普通PCR的區(qū)別在于其使用單一的半簡并引物和低復(fù)性溫度，半簡并引物由特定序列+簡并序列+特定序列三部分組成，因此沒有種屬特異性，也跟DNA的復(fù)雜性無關(guān)，能均勻地擴增真?zhèn)€基因組，尤其適用于痕量DNA樣品的擴增。本產(chǎn)品是在經(jīng)典DOP-PCR基礎(chǔ)上經(jīng)過精心優(yōu)化而來，產(chǎn)品具有下列特點：
1. 改進(jìn)了DOP-PCR的循環(huán)參數(shù)。
2. 優(yōu)化的引物濃度，使自連序列和非模板相關(guān)序列的合成。
3. 可使用各種來源的樣品，包括全血，干血，發(fā)根，口腔粘膜刮液培養(yǎng)細(xì)胞，真菌和病毒等。
4. 操作簡便快捷，恒溫（30℃）反應(yīng)，無須PCR儀即可實現(xiàn)擴增。
5. 產(chǎn)物可用于多種后續(xù)試驗，包括多重PCR、長片斷PCR、定量PCR、克隆、文庫構(gòu)建、單倍型分析、測序、基因芯片分析、各種遺傳分析（片段差異，微衛(wèi)星差異，SNP，STR）等。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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