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ELISA操作步驟過程九要素

閱讀:412發(fā)布時間:2019-8-23

ELISA實驗過程中,操作過程中有一些易被人們忽視小細節(jié),但這些小細節(jié)卻對實驗效果會發(fā)作直接影響。以下是ELISA控制操作過程的九點要素:

一、嚴格依照試劑說明書進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。

二、加樣后及時放人孵箱。標本較多時,要分批操作。按說明過程嚴峻控制操作時間,避免孵育時間人為延伸,導致非特異性結合緊附于反響孔周圍,難以清洗*。

三、封板溫育時,各孔一定要封嚴,避免陽性標本的液體蒸騰,發(fā)作周邊現(xiàn)象然后導致“花板”的出現(xiàn)。

四、用洗板機洗板時,保證洗液注滿各孔,洗板針疏通,洗完板后在吸水紙(選擇潔凈、無或少塵的吸水資料)上輕輕拍干:還要避免針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易發(fā)作拖帶現(xiàn)象而導致“花板”的出現(xiàn)。

合理安排檢測量,以免反響板過多造成洗板等候時間長。

、加酶試劑后用吸水紙在酶標板外表輕拭吸干。

七、顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。

八、加樣時堅持顯色劑不外流;A、B液應避免接觸金屬器械。加終止液時應避免發(fā)作氣泡。

九、應保證酶標板清潔,整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸。以上的辦法可以使“花板”降限。然后前進檢測的特異性。并得到更、牢靠的實驗效果。


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