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閱讀:392發(fā)布時間:2019-9-10
ELISA試劑盒進(jìn)行洗刷作業(yè)時,首要采用以下兩種方法。
流水沖刷式:用于小珠載體的洗刷,洗刷液僅為蒸餾水甚至可用自來水。洗刷時附接一特別設(shè)備,使小珠在流水沖擊下不斷地滾動淋洗,持續(xù)沖刷2分鐘后,吸干液體,再用蒸餾水浸泡2分鐘,吸干即可。浸泡式猶如盆浴,流水沖刷式則比如淋浴,其洗刷作用更為*,且也簡潔、快速。已有實驗表明,流水沖刷式相同也適用于微量滴定板的洗刷。洗刷時設(shè)法加大水流量或加大水壓,讓水流沖擊板孔表面,洗刷作用更佳。
浸泡式:吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液;
用洗刷液過洗一遍(將洗刷液注滿板孔后,即甩去);
浸泡,行將洗刷液注滿板孔,放置1-2分鐘,間歇搖動,浸泡時間不可隨意縮短;
吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干;
洗刷3-4次,或按說明規(guī)矩。在間接法中如本底較高,可增加洗刷次數(shù)或延長浸泡時間。
ELISA試劑盒的設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度規(guī)劃要有一個比較大的跨度,而且要能包括你所要檢測實驗樣品的濃度,即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度規(guī)劃之內(nèi),包括上限和下限,而關(guān)于呈S型的標(biāo)準(zhǔn)曲線,盡量要使實驗樣品的濃度在中間斜度及陡段,即曲線簡直成直線的規(guī)劃內(nèi)。
用倍比稀釋法制造標(biāo)準(zhǔn)曲線中的標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度,這樣就可以確保標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度不會出現(xiàn)較大的偏離。
樣品的濃度等方針是依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出來的,所以要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事,不然后邊的實驗效果無從談起。
做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)因?qū)嶒炓蟛煌兴淖?,但一般來說,相關(guān)系數(shù)R至少要大于0.98,關(guān)于有些實驗,至少要0.99甚至是0.999。
檢測標(biāo)準(zhǔn)樣品時,應(yīng)按濃度遞加順序進(jìn)行,以減少高濃度對低濃度的影響,提高準(zhǔn)確性。
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