分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。它是帶狀光譜，反映了分子中某些基團的信息。可以用標(biāo)準(zhǔn)光圖譜再結(jié)合其它手段進行定性分析。在使用過程中常常會出現(xiàn)測量誤差，這些誤差又是如何產(chǎn)生的呢?
1、復(fù)色光對比耳定律的偏離
比耳定律成立的前提條件是人射光是單色光，但是精度再高的儀器，即使是雙單色器的分光光度計，也只能獲得近乎單色的光，無法獲得純單色光，它仍然含有狹窄光通帶，具有復(fù)色光的性質(zhì)。而復(fù)色光會導(dǎo)致比耳定律的正或負(fù)偏離。
固定狹縫的紫外分光光度計光譜帶寬一般為1nm或2nm，可調(diào)狹縫的可以做到0.1nm；可見分光光度計帶寬6nm、snm，甚至十幾納米。
光譜帶寬應(yīng)該是越小越好，但是,隨著光譜分辨率的提高，儀器的靈敏度降低，所以，選擇儀器時要綜合考慮各種條件的影響。當(dāng)溶液濃度較小且單色光較純時，可近似認(rèn)為符合比耳定律。
2、雜散光的影響
雜散光是指進人檢測器的處于待測波長光譜帶寬范圍外的其他波長組分，它是光譜測量中誤差的主要來源。
產(chǎn)生原因有:
分光光度計的色散元件、反射鏡、透鏡及單色器內(nèi)壁灰塵等。在分光光度計工作波段邊緣波長處，由于單色器透光率、光源輻射強度、檢測器靈敏度都較低，雜散光的影響更為顯著。
雜散光限制儀器的分析上限可引起嚴(yán)重的測量誤差，實際工作中，在定量分析時，一般在吸收峰或其附近處測量樣品吸光度，如果在分析波長處含有雜散光，這時樣品的透光率較小，而雜散光大部分透過，使測量吸光度低于真實吸光度。
3、儀器噪聲對測t的影響
儀器噪聲也是儀器的一個重要指標(biāo)，它表征儀器做稀溶液的能力。是疊加在待測量的分析信號中的不需要的信號，掃描100T和0%T線，可觀察到分光光度計的噪聲水平，如果儀器噪聲較大，會掩蓋較小的測量信號，一般用噪音的二倍來表示儀器的靈敏度。
4、波長和吸光度準(zhǔn)確度
樣品的每一個值都是在一定的波長下測得的，如果，波長誤差很大，測出的值肯定不準(zhǔn)。吸光度準(zhǔn)確度也是用戶對儀器的直接要求，更應(yīng)引起足夠的重視。
國家計量檢定規(guī)程規(guī)定雙光束紫外可見分光光度計透射比準(zhǔn)確度為*士0.6%， B級土1.0%。
此外分光光度計的使用要避免以下幾種環(huán)境
1、不能在溫度太高和太低及濕度太高的環(huán)境下進行使用。大家需要知道多的電子設(shè)備都是怕潮濕環(huán)境的，潮濕環(huán)境下使用不但設(shè)備精確度相對低，而且還易發(fā)生污染設(shè)備或者損壞設(shè)備的情況發(fā)生，包括使用環(huán)境溫度太高和太低都不行，通常紫外可見分光光度計使用的合適溫度范圍在5攝氏度到35攝氏度之間。
2、不能在沒有穩(wěn)定性和不平穩(wěn)的環(huán)境下使用。該設(shè)備在整個使用中就怕的就是沒有好的穩(wěn)定性發(fā)生一些強烈震動或者持續(xù)震動情況，在這種情況下會導(dǎo)致設(shè)備損壞情況的發(fā)生，想要避免紫外可見分光光度計要使用在一些有堅固穩(wěn)定的工作臺上才好。
3、不能使用在強的照明環(huán)境下。這種設(shè)備使用在強的照明環(huán)境下，尤其使用在日光直射的環(huán)境下就會導(dǎo)致設(shè)備工作的不正常，建議設(shè)備需要在室內(nèi)照明不宜太強且避免日光直射下才能正常的使用。
4、不能使用在電風(fēng)扇直吹的環(huán)境下?，F(xiàn)在正值夏天環(huán)境溫度高，很多使用者就想到用電風(fēng)扇直吹設(shè)備的方法進行使用，事實上這種使用會造成設(shè)備的受損，建議需要在裝有空調(diào)房屋內(nèi)使用才行。
