大多數(shù)商業(yè)化的蛋白激酶檢測試劑盒都是基于對磷酸肽形成或ATP缺失的監(jiān)測。對于基于磷酸肽檢測的激酶測定試劑盒，人們不得不花費(fèi)時(shí)間和精力來鑒定優(yōu)化的肽底物，而ATP消耗方法由于使用了受多種生物化合物抑制或激活的熒光素酶而遭受了各種干擾。Amplite™通用激酶測定試劑盒基于對ADP形成的監(jiān)測，該形成與酶磷酸轉(zhuǎn)移酶活性成正比，并進(jìn)行熒光測定。該試劑盒提供了一種快速，簡單且均一的測定激酶活性的測定方法。高靈敏度（<0.2 uM ADP），寬泛的ATP耐受性（1-300 uM），非抗體，非放射性和免清洗方法可檢測由于酶活性而產(chǎn)生的ADP量，使其成為測定激酶Michaelis-Menten動力學(xué)以及篩選和鑒定激酶抑制劑的理想試劑盒?？梢砸苑奖愕?6孔或384孔微量滴定板形式進(jìn)行測定，無需任何分離步驟即可輕松實(shí)現(xiàn)自動化。

1. 運(yùn)行激酶反應(yīng)（20 µL）
2. 添加ADP傳感器緩沖液（20 µL）
3. 添加ADP傳感器工作溶液（10 µL）
4. 在室溫下孵育15分鐘-1小時(shí)
5. 監(jiān)測Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570nm）的熒光強(qiáng)度

重要說明
使用前，請?jiān)谑覝叵陆鈨鏊辛N成分。強(qiáng)烈建議使用黑色印版以獲得*效果。ADP分析應(yīng)在6.5至7.4的pH下進(jìn)行。避免將ADP傳感器I（組件B1）直接暴露在光下。避免來自外來生物源的潛在ADP污染。

儲備溶液的制備

除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應(yīng)分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲存在-20°C下。避免重復(fù)凍融循環(huán)。

1. ADP傳感器I儲備溶液（50X）：
將50 µL DMSO（組分B3）添加到ADP傳感器1（組分B1）的小瓶中，制成50X ADP傳感器I儲備溶液。

2. ADP標(biāo)準(zhǔn)溶液（300 mM）：
將100 µL ddH ₂ O加入ADP標(biāo)準(zhǔn)溶液（組分C）中，制成300 mM ADP標(biāo)準(zhǔn)溶液。