免疫原
擬南芥gln -1 -1、1-2、1-3和1-4的各種異構(gòu)體(At5g37600、At1g66200、At3g17820、At5g16570)合成klh偶聯(lián)肽
主機(jī)的兔子
單克隆多克隆
純度血清
格式凍干
量50µl
復(fù)配時(shí),加入50µl無(wú)菌水
-20°C保存凍干/重組;一旦重組,使公平,以避免重復(fù)凍融循環(huán),請(qǐng)記住,在打開(kāi)之前,旋轉(zhuǎn)管短暫,以避免任何損失,凍干材料粘附在瓶蓋或管的兩側(cè)
Western blot (WB)
推薦稀釋倍數(shù)1:10 000 (WB)
預(yù)期|表觀MW
39-40 kDa (GLN1,細(xì)胞質(zhì)型),44-45 kDa (GLN2,葉綠體型)
應(yīng)用實(shí)例
使用anti-GS(全局Gln1/Gln2)抗體進(jìn)行Western blot檢測(cè)
從擬南芥葉片組織(Atn非衰老葉片)、擬南芥葉片組織(Ats衰老葉片)、山松針葉組織(PSA-J)中新鮮提取總蛋白10 g,用1 M Tris-HCl, pH 6.8, 10 % SDS, 15 %蔗糖,0.5 DTT, 75°C變性5分鐘,在10% Bis-Tris Nupage Novex凝膠上分離(120 V/45分鐘,使用MES緩沖系統(tǒng)),印跡30分鐘至PVDF。用5%脫脂牛奶45分鐘/RT,攪拌。用一抗1:10 000稀釋1小時(shí)/RT,攪拌,加入2%脫脂牛奶TBS或ON/4℃攪拌。將抗體溶液倒出,在TBS中攪拌,在RT下短暫沖洗印跡兩次,共10分鐘。用Agrisera匹配的二抗(抗兔IgG馬蘿卜過(guò)氧化物酶偶聯(lián),AS09 602)稀釋至1:75 000,攪拌,1h/RT。將印跡沖洗后,用化學(xué)發(fā)光檢測(cè)顯影。曝光時(shí)間為26.5秒。