泛素化多肽序列 - 特異性抗體
服務(wù)編號(hào)：YKSP-1012
服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)：
1.泛素化多肽ELISA效價(jià)大于80，000
2.泛素化多肽與非泛素化多肽效價(jià)區(qū)分大于16倍（ELISA、Dot Blot）
3.3-5 mg泛素化特異性抗體
交付的材料：
1.0.5 ml免疫前血清, 1 ml 免疫后血清
2.總計(jì)3-5mg抗原親和純化的泛素化特異性抗體，
3.1 mg泛素化多肽，1 mg非泛素化多肽，0.1 mg泛素多肽-BSA偶聯(lián)物，0.1 mg非泛素化多肽-BSA偶聯(lián)物
4.Elisa數(shù)據(jù)報(bào)告，Dot Blot報(bào)告，完整項(xiàng)目報(bào)告
可變區(qū)和恒定區(qū)
通過(guò)分析不同Ig重鏈和輕鏈的氨基酸序列發(fā)現(xiàn)，重鏈和輕鏈靠近N端的約1 10個(gè)氨基酸序列變化很大，其他部分氨基酸序列相對(duì)恒定。因此，將Ig輕鏈和重鏈中靠近N端氨基酸序列變化較大的區(qū)域稱為可變區(qū)(variable region，V)，分別占重鏈和輕鏈的1/4和1/2；將靠近C端的氨基酸序列相對(duì)穩(wěn)定的區(qū)域，稱為恒定區(qū)(constant region，C)，分別占重鏈和輕鏈的3/4和1/2。
1．可變區(qū) 重鏈和輕鏈的V區(qū)分別稱為VH和VL。VH和VL中各含有3個(gè)氨基酸組成和排列順序高度可變的區(qū)域，稱為高變區(qū)(hypervariable region，HVR)或互補(bǔ)決定區(qū)(complementarity determining region，CDR)， 包括HVRl(CDRl)、HVR2(CDR2) 和HVR3(CDR3)，其中，HVR3(CDR3)變化程度更高。VH的3個(gè)高變區(qū)分別位于29～31、49～58和95～102位氨基酸，而VL的3個(gè)高變區(qū)分別位于28～35、49～56和91～98位氨基酸。VH和VL的3個(gè)CDR共同組成Ig的抗原結(jié)合部位(antigen-binding site)，決定抗體的特異性，是抗體識(shí)別及結(jié)合抗原的部位。在V區(qū)中，CDR之外區(qū)域的氨基酸組成和排列順序相對(duì)保守，稱為骨架區(qū)(framework region，F(xiàn)R)。VH或VL各有四個(gè)骨架區(qū)，分別用 FR1、FR2、FR3和FR4表示。
2．恒定區(qū) 重鏈和輕鏈的C區(qū)分別稱為CH和CL。不同型(κ或λ)Ig的CL長(zhǎng)度基本*，但是不同類Ig的CH長(zhǎng)度不同，例如IgG、IgA和IgD包括CH1、CH2和CH3，而IgM和IgE則包括CHl、CH2、CH3和CH4。
(三)鉸鏈區(qū)
鉸鏈區(qū)(hinge region)位于CH1與CH2之間，富含*，易伸展彎曲，從而改變抗原結(jié)合部位之間的距離，有利于抗體結(jié)合位于不同位置的抗原表位。鉸鏈區(qū)易被木瓜蛋白酶、*等水解，產(chǎn)生不同的水解片段。不同類Ig的鉸鏈區(qū)不盡相同，例如人IgGl、IgG2、IgG4和IgA的鉸鏈區(qū)較短，IgG3和IgD的鉸鏈區(qū)較長(zhǎng)，而IgM和IgE無(wú)鉸鏈區(qū)。
二、抗體的結(jié)構(gòu)域
Ig分子的兩條重鏈和兩條輕鏈都可折疊成數(shù)個(gè)球形結(jié)構(gòu)域(domain)，每個(gè)結(jié)構(gòu)域行使其相應(yīng)的功能。輕鏈有VL和CL兩個(gè)結(jié)構(gòu)域；IgG、IgA和IgD的重鏈有VH、CH1、CH2和CH3四個(gè)結(jié)構(gòu)域；IgM和IgE的重鏈有五個(gè)結(jié)構(gòu)域，即多一個(gè)CH4結(jié)構(gòu)域。每個(gè)結(jié)構(gòu)域由約110個(gè)氨基酸組成，氨基酸序列具有相似性，其二級(jí)結(jié)構(gòu)是由幾條多肽鏈折疊形成的兩個(gè)反向平行的β片層(anti—parallel β sheet)構(gòu)成的，兩個(gè)β片層中心的兩個(gè)半*殘基由一個(gè)鏈內(nèi)二硫鍵垂直連接，形成一個(gè)“β桶狀(βbarrel)"或“β-三明治 (β sandwich)"結(jié)構(gòu)，這種折式稱為免疫球蛋白折疊(immunoglobulin folding)。許多膜型和分泌型的蛋白質(zhì)分子也含有這類*折疊的二級(jí)結(jié)構(gòu)，因此，這類分子被統(tǒng)稱為免疫球蛋白超家族(immunoglobulinsuperfamily，IgSF)
抗體分子的水解片段
在一定條件下，Ig分子肽鏈的某些部分易被蛋白酶水解為不同片段。木瓜蛋白酶(papain)和*(pepsin)是較常用的兩種Ig蛋白水解酶，并可籍此研究Ig的結(jié)構(gòu)和功能，分離和純化特定的12多肽片段。
(一) 木瓜蛋白酶水解片段
木瓜蛋白酶水解Ig的部位是在鉸鏈區(qū)二硫鍵連接的兩條重鏈的近N端，可將Ig裂解為兩個(gè)*相同的Fab段和一個(gè)Fc段。Fab段即抗原結(jié)合片段(fragment antigenbinding，F(xiàn)ab)，由一條完整的輕鏈與重鏈的VH和CHl結(jié)構(gòu)域組成。一個(gè)Fab片段為單價(jià)，可與抗原結(jié)合但不產(chǎn)生凝集反應(yīng)或沉淀反應(yīng)；Fc段即可結(jié)晶片段(fragment crystallizable，F(xiàn)c)，由Ig的CH2和CH3結(jié)構(gòu)域組成。Fc段無(wú)抗原結(jié)合活性，是Ig與效應(yīng)分子或細(xì)胞相互作用的部位。
(二)*水解片段
*作用于鉸鏈區(qū)二硫鍵所連接的兩條重鏈的近c(diǎn)端，水解Ig后可獲得一個(gè)F(ab’)2片段和一些小片段pFc ’。F(ab’)2是由兩個(gè)Fab段及鉸鏈區(qū)組成，由于Ig分子的兩個(gè)臂仍由二硫鍵連接，因此F(ab’)2片段為雙價(jià)，可同時(shí)結(jié)合兩個(gè)抗原表位，與抗原結(jié)合可發(fā)生凝集反應(yīng)和沉淀反應(yīng)。由于F(ab’)2片段既保留了結(jié)合相應(yīng)抗原的生物學(xué)活性，又避免了Fc段免疫原性可能引起的副作用，因而被廣泛用于制備生物制品，如*、*均是經(jīng)*消化后精制提純的生物制品。*水解Ig后所產(chǎn)生的pFc 終被降解，無(wú)生物學(xué)作用
泛素化多肽序列 - 特異性抗體
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