兔子催乳素（PRL）ELISA試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。預先包被的抗體為催乳素(PRL/LTH)單克隆抗體，檢測相抗體為多克隆抗體，經(jīng)標記。樣品和標記抗體先后加入酶標板孔反應后，經(jīng)PBS或TBS洗滌，隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應；經(jīng)過PBS或TBS的洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。
使用兔子催乳素（PRL）ELISA試劑盒前要做好這些準備工作：
1、請?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫后方可進行試驗；
2、將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:25)。未用完的放回。
3、標準品:加入標準品稀釋液1.0ml至凍干標準品中，靜置10分鐘，待其充分溶解后，輕輕混勻，之后在管身標注①，然后根據(jù)需要進行稀釋注意：務必要保證凍干標準品溶解和混勻。
4、標準品稀釋方法：取7支潔凈的試劑管，分別標注②,③,④,⑤,⑥,⑦,⑧.每管加入300μl標準品稀釋液。從第①管內(nèi)取出300μl加入到第②管，混勻后，再從第②管取出300μl加入到第③管，以此類推至第⑦管。第⑧管為標準品稀釋液，作為陰性對照使用。
5、抗體工作液：按當次試驗所需用量，用抗體稀釋液稀釋濃縮化抗體(1:100)，配置成化抗體工作液。使用前30分鐘準備，僅供當日使用。
6、酶結合物工作液：按當次試驗所需要用量，用酶結合物稀釋液稀釋濃縮酶結合物(1:100)，配置成酶結合物工作液。使用前30分鐘準備，僅供當日使用。
7、TMB顯色工作液：在使用兔子催乳素（PRL）ELISA試劑盒使用之前30分鐘，按TMB顯色液Ax9份加TMB顯色液Bx1份（9：1）的比例配制TMB顯色工作液。
