雞分泌型免疫球蛋白A（SIgA）ELISA試劑盒的處理都有一定的標(biāo)準(zhǔn)和要求，在我們拿到試劑盒之后，我們會(huì)發(fā)現(xiàn)每個(gè)試劑盒都有相應(yīng)的說明，并且每個(gè)說明將包括樣品的稀釋比例和稀釋劑。那么你知道為什么ELISA測(cè)試血清樣品需要稀釋？原因有兩個(gè)：
1、比賽按捺對(duì)比明顯，應(yīng)稀釋比賽物；
2、為了減少非特異性反應(yīng)，可以充分反映特異性抗原-抗體反應(yīng)。
可用普通PBS稀釋血清，并添加1％BSA，可有效降低ELISA背景。當(dāng)然，如果您太麻煩，我認(rèn)為用鹽水代替PBS并不大。無論使用直接競(jìng)爭(zhēng)還是直接競(jìng)爭(zhēng)，都必須事先確認(rèn)血清的稀釋倍數(shù)，但不必太小。您可以進(jìn)行初步實(shí)驗(yàn)，并選擇OD為1.0左右的稀釋因子，即ELISA中的陰性孔。OD為1.0，因此以這種方式繪制的曲線很敏感。
在雞分泌型免疫球蛋白A（SIgA）ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中稀釋血清的過程：
1、將蛋白質(zhì)稀釋一定倍數(shù)，例如10倍或20倍稀釋（這可以大致確定一個(gè)參數(shù)），并進(jìn)行一系列稀釋以包被抗原Micro反應(yīng)板。
2、用一定稀釋度的陽性參考血清和陰性參考血清孵育并洗滌，然后加入酶結(jié)合物進(jìn)行反應(yīng)，孵育并洗滌后，加入底物溶液顯色，停止反應(yīng)并分別測(cè)量OD值選擇OD≥1.0的抗原稀釋液作為合適的包被濃度。通常，雞分泌型免疫球蛋白A（SIgA）ELISA試劑盒稀釋始終選擇略大于1.0的O.D值，而不選擇小于1.0的抗原濃度，陰性是指血清O.D值要求。
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