人乳酸(Lactate)ELISA試劑盒的組件包括酶標(biāo)板,標(biāo)準(zhǔn)液,稀釋液等??蛻粜枰匆韵虏襟E準(zhǔn)備自己的試劑和設(shè)備:
1、酶標(biāo)儀。
2、自動(dòng)或手動(dòng)洗板機(jī)。
3、孵化器。
4、可調(diào)節(jié)的移液器和吸頭,一次要檢測(cè)的樣品很多時(shí),請(qǐng)使用多通道移液器。
5、清潔試管和Eppendof管。
處理人乳酸(Lactate)ELISA試劑盒的樣品注意事項(xiàng):
收集標(biāo)本之前必須有完整的計(jì)劃,并且必須明確要測(cè)試的成分是否足夠穩(wěn)定。我們提倡及早發(fā)現(xiàn)新鮮標(biāo)本。采集后第二天將要測(cè)試的樣品保存在4°C下以備將來(lái)使用。如果出于特殊原因需要定期收集樣本,請(qǐng)?jiān)谥谱髂P秃褪占牧虾蠹皶r(shí)將樣本放置在-20°C下?;騼?chǔ)存在-70℃。由于冰室和室溫之間存在一定的溫差,因此蛋白質(zhì)很容易降解,直接影響實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量,因此請(qǐng)避免反復(fù)凍融。
人乳酸(Lactate)ELISA試劑盒的特定樣品的處理和要求如下:
1、血清:血液在室溫下自然凝結(jié)10-20分鐘,離心約20分鐘(2000-3000rpm)。仔細(xì)收集上清液。如果在儲(chǔ)存過(guò)程中發(fā)生沉淀,請(qǐng)?jiān)俅坞x心。
2、血漿:應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,并使用10%(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1%肝素或2.0%)EDTA。Na2)混合10-20分鐘后,離心約20分鐘(2000-3000rpm)。仔細(xì)收集上清液。如果形成沉淀,請(qǐng)?jiān)俅坞x心。
3、尿液:收集在無(wú)菌試管中并離心20分鐘(2000-3000rpm)。仔細(xì)收集上清液。如果在儲(chǔ)存過(guò)程中形成沉淀,請(qǐng)?jiān)俅坞x心。胸腔積液,腦脊液,參照慣例。
4、細(xì)胞培養(yǎng)上清液:檢測(cè)分泌成分時(shí),將其收集在無(wú)菌試管中。離心約20分鐘(2000-3000rpm)。仔細(xì)收集上清液。檢測(cè)細(xì)胞中的成分時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度將達(dá)到約100萬(wàn)/ml。通過(guò)反復(fù)冷凍和融化,細(xì)胞破裂破壞并釋放細(xì)胞內(nèi)成分。離心約20分鐘(2000-3000rpm)。仔細(xì)收集上清液。如果在儲(chǔ)存過(guò)程中形成沉淀,請(qǐng)?jiān)俅坞x心。
5、組織樣本:切割樣本后,稱重。加入一定量的PBS,pH7.4??焖倮鋬霾⑴c液氮一起儲(chǔ)存,以備后用。樣品熔化后,仍保持2-8°C的溫度。加入一定量的PBS(pH7.4),然后用手或勻漿器勻漿。離心約20分鐘(2000-3000rpm)。仔細(xì)收集上清液。分裝后,將對(duì)一部分進(jìn)行測(cè)試,將其余部分冷凍以備后用。
6、收集標(biāo)本后盡快提取。提取應(yīng)根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。如果不能立即進(jìn)行測(cè)試,則可以將樣品保存在-20°C下,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
7、含有NaN3的樣品無(wú)法測(cè)試,因?yàn)镹aN3抑制了辣根過(guò)氧化物酶(HRP)的活性。