定量PCR儀其PCR擴(kuò)增原理和普通PCR儀擴(kuò)增原理相同，只是PCR擴(kuò)增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進(jìn)行標(biāo)記，使用引物和熒光探針同時與模板特異性結(jié)合擴(kuò)增。擴(kuò)增的結(jié)果通過熒光信號采集系統(tǒng)實(shí)時采集信號連接輸送到計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)得出量化的實(shí)時結(jié)果輸出。把這PCR儀叫做實(shí)時熒光定量PCR儀(qPCR儀)。熒光定量PCR儀有單通道，雙通道，和多通道。當(dāng)只用一種熒光探針標(biāo)記的時候，選用單通道，有多熒光標(biāo)記的時候用多通道。單通道也可以檢測多熒光的標(biāo)記的目的基因表達(dá)產(chǎn)物，因?yàn)橐淮沃荒軝z測一種目的基因的擴(kuò)增量，需多次擴(kuò)增才能檢測完不同的目的基因片段的量。該儀器主要用于醫(yī)學(xué)臨床檢測，生物醫(yī)藥研發(fā)，食品行業(yè)，科研院校等機(jī)構(gòu)。
 

　　(1)接通電源開關(guān)，PCR儀進(jìn)入準(zhǔn)備狀態(tài);在顯示屏上記錄了當(dāng)前PCR儀的溫度和蓋子(Lid)的溫度。若PCR儀正在運(yùn)行時，須按“ B ”鍵(start/stop)，才能退出運(yùn)行并返回準(zhǔn)備狀態(tài)。
 

　　(2)編寫程序段。在準(zhǔn)備狀態(tài)下按“ C ”鍵(programs)進(jìn)入編程狀態(tài)，選定一程序號，然后按“enter”鍵，進(jìn)入下一程序;按 “A”(list)鍵后，選一文件號(empty program);再按“enter”鍵，進(jìn)入下一程序;按“ABC”鍵，進(jìn)入下一程序，用上下左右鍵號選擇一個字母(A、B、C、D、…)，然后按“enter”鍵，進(jìn)入下一程序;按“name ok”鍵，完成文件命名。
 

　　(3)設(shè)定蓋子的溫度。“lid temp： ℃”，蓋子的溫度一般比變性溫度要高10℃，例如變性溫度是95℃，那么蓋子的溫度就要設(shè)定為105℃。待蓋子預(yù)熱后按“enter”鍵，進(jìn)入下一程序。
 

　　(4)設(shè)定變性溫度、變性時間、延伸溫度、延伸時間、退火溫度、退火時間及循環(huán)總數(shù)等參數(shù)。從*步依次按“enter”鍵進(jìn)入，用四個移位鍵移動設(shè)定位置。先設(shè)定溫度，后設(shè)定時間，全部參數(shù)設(shè)置完后，按“pgm ok”鍵，所設(shè)定的程序自動被保存。
 

　　(5)運(yùn)行程序。檢查設(shè)定是否正確， 按“start”鍵，選擇設(shè)定好的程序，開始運(yùn)行。顯示屏上可觀察到系統(tǒng)運(yùn)行的情況，按“Stop”可停止運(yùn)行。