一、細菌污染
細菌污染為常見,一旦操作稍有不當,就會引起細胞污染,細菌污染后顯微鏡下觀察呈現(xiàn)有黑色細條沙狀,當然,根據(jù)感染的細菌不同,所呈現(xiàn)的狀態(tài)也不盡相同,有球形、桿狀等,其次,培養(yǎng)液發(fā)黃,變渾濁,可明顯看見培養(yǎng)皿中有細沙狀的沉淀物,時不時還有異樣氣味發(fā)出,如下圖所示:
處理方法:
在培養(yǎng)基中加入抗生素處理,可以用四環(huán)素,*,或者*,前兩者的工作濃度是50 μg/mL;*的工作濃度是100 μg/mL。但是,細胞本身也有影響,狀態(tài)大不如從前,所以,防范于未然,正確操作、嚴格執(zhí)行無菌操作規(guī)范,定期清理消毒培養(yǎng)設(shè)施才是關(guān)鍵!
二、真菌污染
真菌污染培養(yǎng)液清亮透明,不會像細菌感染大爆發(fā),所以很難早期發(fā)現(xiàn),鏡下有時候象絲狀,有時候象珊瑚狀,慢慢地會長出很細的黑色絲狀物,這個時候,已經(jīng)晚了,細胞很難救活了。
處理方法:趕緊扔掉,不要再想挽救,即使再珍貴。然后*消毒滅菌培養(yǎng)間,CO2孵箱,器皿和培養(yǎng)液。
三、霉菌污染
同真菌感染一致,因為培養(yǎng)液是清亮的,所以霉菌污染早期難以發(fā)現(xiàn),等發(fā)現(xiàn)時往往已經(jīng)為時過晚了。培養(yǎng)液中慢慢地出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,如同風中柳絮,一般不仔細看發(fā)覺不出來。細胞仍可生長,但時間一長,細胞的狀態(tài)就變差,不再增長。見下圖。
處理方法:建議果斷舍棄該污染細胞,將環(huán)境*消毒,因為霉菌的頑固可能會導致下幾批細胞都會污染,所以,采用酒精*底地擦洗一遍CO2孵箱。然后再用新潔爾滅擦洗一遍,把水盤里加上飽和量的硫酸銅。千萬不可大意!
四、支原體感染
培養(yǎng)液變渾濁,支原體感染細胞以后,細胞病變不很明顯,只是細胞狀態(tài)變差、生長變慢,在顯微鏡下觀察可能會有小黑點,但培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁。細胞傳代以后就出現(xiàn)細胞間黑點,細胞空泡化,很多類似凋亡、壞死的細胞,終細胞漂浮,*死亡。
處理方法:
如果不是很珍貴的細胞的話,建議直接扔了吧。還是那句話,預(yù)防為主,如果是珍貴的細胞的話,建議使用——支原體清除培養(yǎng)基。
好物推薦—支原體清除培養(yǎng)基
此款支原體清除培養(yǎng)基是在市面上已有的支原體清除培養(yǎng)基基礎(chǔ)上開發(fā)的新一代產(chǎn)品,含有清除支原體的特殊成分(一種混合制劑,可通過抑制DNA和支原體生長所必須的相關(guān)蛋白合成來取得良好的支原體清除效果,程度上挽救珍貴的細胞,減少因支原體污染帶來的損失)。
此產(chǎn)品經(jīng)過了數(shù)十種細胞的測試和長期的實驗驗證,對細胞無害,對清除支原體污染*,能夠很好的抑制和殺滅支原體。并且安全可靠,工作濃度低,無細胞毒性。
使用支原體清除培養(yǎng)基處理污染細胞前后對比圖:
五、黑膠蟲污染
開始污染時對細胞無影響,當數(shù)量達到一定程度時就會對細胞產(chǎn)生影響。400倍顯微鏡下可見點狀或片狀游動小體,培養(yǎng)液也是不渾的,一般不會太影響,細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好,且觀測到的運動物無明顯增多,且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化,對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響,在細胞增殖旺盛之后會自然消失,除更換血清外無須特殊處理。
處理方法:可以增加細胞的種板密度,以提高細胞的生存率,盡早處理細胞,越快越好。如果實在來不及了,推薦使用——黑膠蟲清除培養(yǎng)基
好物推薦—黑膠蟲清除培養(yǎng)基
黑膠蟲清除培養(yǎng)基經(jīng)過了上百種細胞的測試和長期的實驗驗證,對細胞無害,對清除“黑膠蟲”污染*,能夠很好的殺滅和抑制“黑膠蟲”,其它品牌的支原體培養(yǎng)基。
使用黑膠蟲清除培養(yǎng)基理污染細胞前后對比圖:
學會對各種污染情況的辨別和處理是一項*的實驗技能,希望大家在看完我們的文章后結(jié)合你的實驗操作,學會如何應(yīng)對細胞污染。
好了,學霸姐姐只能幫你到這里了,剩下的,就靠你自己了。