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微生物量碳測定是評估微生物群落中碳含量的一種方法,這對于理解微生物在生態(tài)系統(tǒng)中的角色和功能至關(guān)重要。
微生物量碳的測定常采用K2CrO7氧化法檢測,實(shí)驗(yàn)步驟:
分別吸取2ml 0.4 mol·L-1的K2CrO7溶液和15ml混合酸放入沸瓶,加入等量的玻璃球。吸取8-10ml浸提液,放入電爐上,安裝好冷凝系統(tǒng),調(diào)壓至130伏開始加熱。從玻璃球沸騰時(shí)開始計(jì)時(shí),保存沸騰30分鐘,期間應(yīng)搖勻兩次。在30分鐘到前2分鐘關(guān)閉電爐,利用余熱繼續(xù)保存沸騰30分鐘,隨后從冷凝管上口加入20ml蒸餾水,清洗冷凝管壁,降低沸瓶溫度。 取下沸瓶,待冷卻至室溫,加入2-3滴指示劑,用準(zhǔn)確標(biāo)定過的(NH4)2Fe(SO4)2溶液進(jìn)行滴定。顏色從黃色à深綠色à天藍(lán)色à淡灰色à紅棕色à終點(diǎn)。同時(shí)用0.5 mol•L-1 K2SO4代替浸提液做空白,注意兩個(gè)電爐之間的差異。 注:(NH4)2Fe(SO4)2溶液的標(biāo)定:在三角瓶中放入0.1 mol·L-1K2CrO7標(biāo)準(zhǔn)溶液10ml,加入混合酸15ml,搖勻冷卻,用(NH4)2Fe(SO4)2溶液滴定,顏色反應(yīng)同上。一般在測定開始和結(jié)束時(shí)各標(biāo)定一次,取平均值。 結(jié)果計(jì)算: C(ug/ml)=[(V空白-V樣本)*N(NH4)2Fe(SO4)2*3*1000]/吸取樣品的體積數(shù)(ml) C(ug/g)=[C(ug/ml)*浸提液的總體積數(shù)(ml)]/W干土(g) EC(ug/g)=C熏蒸(ug/g)-C未熏蒸(ug/g) 微生物量碳BC(ug/g)=EC/0.38(ug/g)
注意事項(xiàng):
實(shí)驗(yàn)過程中要確保所有玻璃器皿干凈無污染。
加熱和滴定過程中要嚴(yán)格控制時(shí)間和溫度。
滴定終點(diǎn)要準(zhǔn)確判斷,避免誤差。
空白實(shí)驗(yàn)和標(biāo)定實(shí)驗(yàn)是確保結(jié)果準(zhǔn)確性的關(guān)鍵步驟,不可忽視。
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