幾乎所有的蛋白合成都起始于N-端，蛋白質(zhì)N-端的序列組成對(duì)于蛋白質(zhì)整體的生物學(xué)功能有著巨大的影響力。例如N-端序列影響蛋白質(zhì)的半衰期，同時(shí)關(guān)聯(lián)著蛋白亞細(xì)胞器定位等，這些與蛋白的功能和穩(wěn)定息息相關(guān)，重組蛋白表達(dá)純化產(chǎn)物的分析過(guò)程，特別是重組蛋白品的研發(fā)和工藝建立過(guò)程，需要對(duì)蛋白進(jìn)行N-端測(cè)序分析，有利于幫助分析蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)，揭示蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能。
蛋白質(zhì)N-端測(cè)定技術(shù)服務(wù)
蛋白質(zhì)N-端測(cè)定技術(shù)服務(wù)服務(wù)簡(jiǎn)介
幾乎所有的蛋白合成都起始于N-端，蛋白質(zhì)N-端的序列組成對(duì)于蛋白質(zhì)整體的生物學(xué)功能有著巨大的影響力。例如N-端序列影響蛋白質(zhì)的半衰期，同時(shí)關(guān)聯(lián)著蛋白亞細(xì)胞器定位等，這些與蛋白的功能和穩(wěn)定息息相關(guān)，重組蛋白表達(dá)純化產(chǎn)物的分析過(guò)程，特別是重組蛋白品的研發(fā)和工藝建立過(guò)程，需要對(duì)蛋白進(jìn)行N-端測(cè)序分析，有利于幫助分析蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)，揭示蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能。
目前對(duì)蛋白N端測(cè)序主要分類兩大類，其一為非質(zhì)譜技術(shù)，例如經(jīng)典的Edman降解法、利用反轉(zhuǎn)錄RT-PCR得到對(duì)應(yīng)蛋白的cDNA，再來(lái)反推得到蛋白序列；其二為質(zhì)譜技術(shù)。各自都有其使用的長(zhǎng)處和制約之處，目前，市面上采用的，依然是基于經(jīng)典的Edman降解法原理，利用美國(guó)ABI公司Procise491蛋白序列測(cè)序系統(tǒng)進(jìn)行蛋白N-端測(cè)序。
蛋白質(zhì)和多肽N-端測(cè)序技術(shù)是以Edman化學(xué)降解法為基礎(chǔ)的，Edman化學(xué)降解，其基本原理是包括通過(guò)異硫氰酸苯脂與蛋白質(zhì)和多肽的N-端殘基的偶聯(lián)，苯氨基硫甲酰酞（PTC-肽）環(huán)化裂解，和噻唑呤酮苯氨（ATZ）轉(zhuǎn)化為苯異硫尿氨基酸（PTH-氨基酸）三個(gè)主要的化學(xué)步驟，每個(gè)循環(huán)從蛋白質(zhì)與多肽裂解一個(gè)氨基酸殘基，同時(shí)暴露出新的游離的氨基酸進(jìn)行下一個(gè)Edman降解，通過(guò)轉(zhuǎn)移的PTH-氨基酸鑒定實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)序列的測(cè)定。
樣品要求
1 蛋白凍干粉，蛋白溶液，固定在PVDF膜上的蛋白（NC膜不可以）。轉(zhuǎn)膜的蛋白質(zhì)，需去離子水充分洗滌干凈，同時(shí)保證每條膜上蛋白量大于1ug。
2、蛋白濃度>1mg/ml， 小量不得低于10Pmol，蛋白純度>90%，測(cè)序樣品不返還。
3、蛋白溶液不含鹽，緩沖液，變性劑（SDS）等雜質(zhì);標(biāo)明樣品緩沖液的成分。
4、天然純化多肽樣品：HPLC純度>95%，提供約100ug
5、如果已知蛋白表觀分子量或理論的蛋白質(zhì)序列，請(qǐng)說(shuō)明。
服務(wù)優(yōu)勢(shì)
一站式服務(wù)：樣品處理-上機(jī)分析-數(shù)據(jù)分析-項(xiàng)目報(bào)告
檢測(cè)能力： N 端連續(xù) 60 個(gè)以上的氨基酸
快速檢測(cè)：合格樣品，1 個(gè)工作日可以出結(jié)果
專業(yè)的技術(shù)服務(wù)團(tuán)隊(duì)
會(huì)員1.png)
