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目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>其它系列>> 單胺氧化酶(MAO)測(cè)試盒微量法

單胺氧化酶(MAO)測(cè)試盒微量法
  • 單胺氧化酶(MAO)測(cè)試盒微量法
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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更新時(shí)間:2023-12-24 17:36:01瀏覽次數(shù):586評(píng)價(jià)

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貨號(hào) BK-01S6931
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本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測(cè)方法

貨號(hào)

單胺氧化酶(MAO)測(cè)試盒微量法

100管/96樣

微量法

BK-01S6931

商品介紹:

測(cè)定意義:

MAO(EC1.4.3.4) 主要存在于脊椎動(dòng)物的各種器官,特別是分泌腺、腦、肝臟,在無脊椎動(dòng)物、豆類的芽等植物中也存在催化單胺類物質(zhì)代謝,含量較低,具有重要的生理功能,其活性能反映肝纖維化的程度。此外,MAO活性異常導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)運(yùn)轉(zhuǎn)出現(xiàn)紊亂,從而引發(fā)多種病癥。

測(cè)定原理:

MAO催化單胺類底物脫氨生成相應(yīng)的醛,進(jìn)一步氧化成酸;底物在360nm處有特征吸收峰,測(cè)定360nm光吸收下降的速率,計(jì)算MAO活性。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:

天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長(zhǎng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

操作步驟:

1. 樣品的準(zhǔn)備:

a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P1511)測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測(cè)定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽(yáng)性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。

2 ug pCMV-HA-C pCMV-HA-C 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

CCDA添加劑 CCDA Supplement 2ml*5支

250g 蛋白胨 Peptone 室溫保存

50T 人黏附分子CD44基因PCRPCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

100μL Ac-DEVD-CHO(Caspase 3抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

250mL Citrate Buffer(檸檬酸鹽緩沖液),0.5M,pH5.0   Citrate Buffer,0.5M,pH5.0   常溫保存

10次 DNA 5’末端標(biāo)記試劑盒 DNA 5’ End-Labeling Kit -20℃保存

2 ug pHT304 pHT304 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

龍膽紫血液瓊脂基礎(chǔ) Crystal violet blood agar base 250g

1瓶 JAR細(xì)胞株 JAR 低溫運(yùn)輸和保存

無菌取樣袋(帶鐵絲)(30cm*18cm)  50個(gè)/包*4

單胺氧化酶(MAO)測(cè)試盒微量法Streptavidin/SA protein  鏈親和素抗體 0.1mlHSP58/Cornulin  熱休克蛋白58抗體 規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-rat IgG/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlMDFIC  肌原調(diào)節(jié)抑制蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

SMS2/Sphingomyelin Synthase 2  鞘磷脂合成2抗體 規(guī)格: 0.2mlMCHR/GPR24  G蛋白偶聯(lián)受體24抗體 規(guī)格: 0.1ml

Anthrax  抗體(采用活疫苗制備) 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-pig IgG/Cy7  Cy7標(biāo)記的兔抗豬IgG 規(guī)格: 0.1ml

GH/Growth Hormone  生激素抗體 規(guī)格: 0.1mlGRAMD2  GRAM結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-CDKN1A/P21 (Thr145)  磷酸化p21蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlEphrin A5  酪蛋白激A5受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

UBE2D4  泛素蛋白連接D4抗體 規(guī)格: 0.2mlAKIRIN1  AKIRIN1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

IFNA11/Limitin/Interferon alpha 11  干擾素α11抗體 規(guī)格: 0.2mlGPVI/Glycoprotein VI  糖蛋白VI/六糖蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

CCDC114  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白114抗體 規(guī)格: 0.2mlADAMTS12  整合素樣金屬蛋白與凝1型-12抗體 0.2ml

CD133 antigen  造干細(xì)胞抗原CD133抗體 規(guī)格: 0.1mlDDX43/CT13  瘤/睪抗原13抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlNOC3L/FAD24  脂肪細(xì)胞分化因子24 規(guī)格: 0.2ml

phospho-RGS19(Tyr143)  磷酸化G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體 規(guī)格: 0.1mlFAM164B  FAM164B蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml



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