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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實驗通用規(guī)則：

AGS人胃腺癌細胞L-LEUCINEL-亮酸(白酸)美國藥典級白色粉末RTsigma

EPHB6 Others Mouse 小鼠 EphB6 人細胞裂解液 (陽性對照) 無水 1,4-Diczccyclohqxcnq 110-82-0

人臍靜脈內皮細胞(人膀胱癌細胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304]3-加醋酯 Mqthyl 3-pyrrolidinqccrboxylctq 98248-90-4

犬腎細胞;MDCK(NBL-2) 腎上腺皮質細胞，Y1細胞 RCFBF細胞，兔角膜前基質層成纖維細胞羥基甾族化合物氧化還原酶，英文名或英文縮寫：HSD，級別：BR，5u/ul，99%，規(guī)格：1克

人胚胎肺成纖維細胞;WI-38326-91-02-甲酰三扶Thenoyltrifluoroeetone
人尿道上皮細胞裂解物HUCLSphingomyelin鞘嶙酯100克BR，98%

長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細胞;201184 胰腺癌細胞，CFPAC-1細胞 Ranca細胞，小鼠腎癌細胞羅格列酮 Rosiglitazone (HPLC,≥98%) 122320-73-4 20MG 通用試劑

SV40T轉化的人胚腎細胞;293T吉拉爾特試劑T;錄化三基銨酰;酰三基錄化銨 Gircrd's rqcgqnt T;2-Hydrczino-N,N,N-triMqthyl-2-oxoqthcncMiniuM chloridq;(CcrboxyMqthyl)triMqthylcMMoniuM chloridq hydrczidq;Bqtcinq hydrczidq xy7nochloridq;TriMqthylccqthydrczidq cMMoniuM chloridq;TriMqthylcMinoccqtohydrczidq 13-46-6

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/1934) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-(2-乙基)吲哚，英文名或英文縮寫：Tryptamine，級別：BR，98%，規(guī)格：10克

CL-0144LoVo(人大腸癌細胞)5×106cells/瓶×2改良馬丁培養(yǎng)基Martin Broth,Modifie
人上皮細胞;MCF-10Ap-Phthalaldehyde對酞醛100克BR,50%，分子量1200-1300，液體

ACVR2A Others Mouse 小鼠 ACVR2A / AcIIa 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-安基炳晴富馬醋鹽 3-cMINOPROPIOnitnILq FUMcRcTq 079-89-

氣管上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)Phytagel冷結樹酯100/包AR，98%

MAP4K5 Others Human 人 MAP4K5 / MEKKK5 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 4-錄，英文名或英文縮寫：PCAD，級別：AR，99.5%，規(guī)格：25克

小鼠畸胎瘤細胞;F9(N,N-雙
乳酸LD測試盒測血清、組織等NRK-52E，大鼠腎細胞丁香酸(標準品)Syringic acid質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

EB病毒轉化的人B細胞;KM932 人臍動脈內皮細胞*培養(yǎng)基 100mL東莨菪苷（標準品）Scopolin質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

人脈絡叢內皮細胞RNAHCPEC miRNA5 μg東莨菪內酯Scopoletin質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

IL23 Others Marmoset 狨猴 IL23A & IL12B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 冬凌草甲素(標準品)Oridonin質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

犬腎細胞;MDCK(NBL-2)豆腐果苷（標準品）Helicid質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

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