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目錄:上海聯(lián)祖生物科技有限公司>>生化試劑盒>>輔酶II系列>> NADPMENADP蘋果酸酶測試盒微量法

NADPMENADP蘋果酸酶測試盒微量法
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貨號(hào) LZ-01357S
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產(chǎn)品名稱:NADPMENADP蘋果酸酶測試盒微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣

檢測方法:微量法

產(chǎn)品貨號(hào):LZ-01357S

產(chǎn)品分類:輔酶Ⅱ系列
商品介紹:

測定意義

ME廣泛存在于微生物、培養(yǎng)細(xì)胞、動(dòng)物和植物胞漿中,尤其在植物組織中活性較高。ME催化蘋果酸氧化脫羧的可逆反應(yīng),產(chǎn)生丙酮酸和CO2,以及伴隨NAD(P)+的還原反應(yīng),是蘋果酸代謝的關(guān)鍵酶。ME活性與生物合成和抗氧化密切相關(guān)。近年來植物ME活性測定較多,已經(jīng)成為抗氧化研究的熱點(diǎn)。根據(jù)輔酶專一性和對(duì)底物特異性的不同,可將ME分為NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。

測定原理:

NADP-ME催化NADP+還原成NADPH,在340nm下測定NADPH增加速率。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。

2). 過濾混濁溶液。

3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。

4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。

5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。

6 ). 用空白樣品做對(duì)照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。

7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。

9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

10).含脂肪的樣品用熱水提取。


QQ截圖20220307153443.png

特點(diǎn):
1)應(yīng)用廣泛

由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

2)靈敏度高

由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。

3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。

4)準(zhǔn)確度高

對(duì)于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。

5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。

6)分析成本低、操作簡便、快速。

c-fos 檢測試劑盒槐果草鍶 5N,99.999%三聚硫  95%

c-fos 檢測試劑盒槐角苷四硫磺鈉,二水 98%偏硅鈉,五水 95%

c-myc癌因產(chǎn)物(c-myc)檢測試劑盒還原型硫-5-羥色肌酐 98%零水偏硅鈉 SiO2, 44-47%

c-myc癌因產(chǎn)物(c-myc)檢測試劑盒環(huán)巴(-)-鹽東莨菪 ≥99.0% 偏硅鈉,九水 AR

Smad1 檢測試劑盒 環(huán)黃芪(-)-鹽東莨菪 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.0% 鈦四丁酯 CP,98.0%

Smad1 檢測試劑盒 環(huán)氧前胡糖精鈉 分析標(biāo)準(zhǔn)品鈦四丁酯 ≥99.0% (GC)

Smad7 檢測試劑盒 環(huán)氧續(xù)隨子環(huán)草隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品薯蕷皂素 90%

Smad7 檢測試劑盒 環(huán)氧澤瀉烯2,4,5-涕  分析標(biāo)準(zhǔn)品橙皮素 分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥98%

腫瘤相關(guān)抗原(TAA)檢測試劑盒 黃柏乙鈉,無水 電泳級(jí), ≥99%橙皮素 97%

腫瘤相關(guān)抗原(TAA)檢測試劑盒 黃柏十二烷硫鈉 分子生物學(xué)級(jí),≥98.5% (GC)番茄紅素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥95%

TGF-β誘導(dǎo)早期因1(TIEG1)檢測試劑盒 黃豆黃苷十二烷硫鈉 離子對(duì)色譜級(jí),≥99.0% (GC)胡椒 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98%

TGF-β誘導(dǎo)早期因1(TIEG1)檢測試劑盒 黃豆黃素化釤(III),六水 99%槲皮苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%

腫瘤血管生長因子(TAF)檢測試劑盒 黃獨(dú)素B氟化銀(I)  99%白藜蘆 分析標(biāo)準(zhǔn)品

腫瘤血管生長因子(TAF)檢測試劑盒 黃腐酚四丁酚 試劑級(jí)迷迭香 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97%

角蛋白20(CK-20)檢測試劑盒 黃花敗醬甙C噻苯隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品2,6-二-4-三氟 98%

角蛋白20(CK-20)檢測試劑盒 黃決明素噻苯隆 用于植物培養(yǎng)2,6-二-4-氨 98%
NADPMENADP蘋果酸酶測試盒微量法Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGHuman, Mouse, Rat

PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG巴卡丁 IIIHuman, Mouse, Rat

PE-Cy7標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG白藜蘆Human, Mouse

羅丹明標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGHuman, Mouse

FITC標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG蓓薩羅丁;貝沙羅汀Human, Mouse

膠體金標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG苯丁氮芥Human, Mouse, Rat

性磷酶(AP)標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG苯酰十字孢(PKC-412)Human, Mouse, Rat

性磷酶(AP)標(biāo)記的羊抗兔IgG比卡魯Human, Mouse

FITC標(biāo)記的羊抗兔IgG吡非尼,哌非尼Human, Mouse, Rat

操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

 


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