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初級(jí)會(huì)員 | 第5年

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熒光探針
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檢測(cè)細(xì)胞活性與毒性

時(shí)間:2023/10/27閱讀:64
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    細(xì)胞活性通常與細(xì)胞健康以及細(xì)胞群成功存活并正常運(yùn)作的能力相對(duì)應(yīng)。細(xì)胞活性的檢測(cè)可用于使細(xì)胞行為與種群中的存活細(xì)胞數(shù)量相關(guān),優(yōu)化培養(yǎng)物中維持的細(xì)胞種群的生長(zhǎng)條件,測(cè)試毒理學(xué)或評(píng)估潛在候選藥物的功效。定義細(xì)胞存活力的參數(shù)可以是多種多樣的,范圍從細(xì)胞膜的完整性或細(xì)胞內(nèi)酶的活性到線立體的膜電位或細(xì)胞群的氧化還原電位。

  

我們的細(xì)胞活性檢測(cè)試劑和檢測(cè)方法旨在檢測(cè)細(xì)胞活性的不同特征,并使用酶標(biāo)儀,熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀產(chǎn)生可見(jiàn)的細(xì)胞健康度數(shù)。

 

百螢整理的檢測(cè)細(xì)胞活性與毒性的方法有以下幾種

 

1.染色排除法

  使用不滲透細(xì)胞的染料區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。由于死細(xì)胞膜破裂,染料流入細(xì)胞并被染色,而活細(xì)胞則不染色。臺(tái)盼藍(lán)或其他不滲透細(xì)胞的DNA結(jié)合染料是這種方法中的常用染料。

 

2.還原性染料檢測(cè)法

  氧化還原能力是與細(xì)胞代謝/種群存活細(xì)胞相關(guān)聯(lián)的。使用發(fā)光/熒光指示劑,WST-8和刃天青,以檢測(cè)細(xì)胞的代謝活性。WST-8和刃天青的低細(xì)胞毒性便于需要更長(zhǎng)孵育時(shí)間的測(cè)定。

 

3.熒光脂酶底物檢測(cè)法

  細(xì)胞滲透型脂酶底物通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞酶活性和膜完整性來(lái)確定細(xì)胞活性。在擴(kuò)散到活細(xì)胞中后,細(xì)胞內(nèi)脂酶將所述底物水解成熒光化合物,該熒光化合物能夠保留在細(xì)胞內(nèi)一段時(shí)間,產(chǎn)生的信號(hào)強(qiáng)度與活細(xì)胞數(shù)量成正比,可以使用熒光儀器檢測(cè)。

 

4.線粒體膜電位檢測(cè)法

  線粒體膜電位的喪失是細(xì)胞凋亡的早期特征,可以使用膜電位探針間接檢測(cè)細(xì)胞活性。這些陽(yáng)離子探針易于通過(guò)線粒體膜電位隔離并染色活性線粒體,以鑒定活細(xì)胞。



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