Amplite 比色法丙三醇檢測試劑盒是美國AAT Bioquest生產(chǎn)的用于檢測丙三醇的試劑盒，甘油是肝臟和脂肪組織中合成甘油三酯和磷脂的前體。 禁食時(shí)，儲存在這些脂滴中的甘油三酯可被水解以產(chǎn)生游離甘油和脂肪酸。 釋放到血流中的游離甘油的量與甘油三酯/脂肪酸循環(huán)速率成正比，甘油三酯/脂肪酸循環(huán)速率在代謝調(diào)節(jié)和熱量產(chǎn)生中是重要的。 Amplite 比色甘油測定試劑盒為測量生物樣品中的甘油水平提供了一種靈敏的測定方法。 該測定基于甘油的酶偶聯(lián)反應(yīng)，其中在HRP偶聯(lián)反應(yīng)中使用我們的Amplite Red HRP底物可以檢測產(chǎn)物過氧化氫。 信號可以使用OD575nm的吸光度酶標(biāo)儀進(jìn)行測量。 使用這種比色甘油測定試劑盒，我們能夠在100μL反應(yīng)體積中檢測到低至0.15μg/ mL（?1.6μM）的甘油。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供優(yōu)質(zhì)的Amplite 比色法丙三醇檢測試劑盒。

樣品實(shí)驗(yàn)方案

簡要概述

1.準(zhǔn)備甘油工作溶液（50 µL）
2.加入甘油標(biāo)準(zhǔn)品或測試樣品（50 µL）
3.在室溫下孵育30分鐘至1小時(shí)
4.監(jiān)測575 nm的OD

溶液制備

1.儲備溶液

所有未使用的儲備溶液應(yīng)分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲存在-20°C下。 避免重復(fù)凍融循環(huán)。
1.1 Amplite HRP底物儲備液（200X）：
將50 µL DMSO（組分E）添加到Amplite HRP底物（組分A）的小瓶中，制成200X儲備溶液。

1.2 甘油標(biāo)準(zhǔn)溶液：
將1 mL ddH2O或1X PBS緩沖液添加到小瓶甘油標(biāo)準(zhǔn)品（組分D）中，制成1 mg / mL甘油標(biāo)準(zhǔn)液。

2.標(biāo)準(zhǔn)溶液

甘油標(biāo)準(zhǔn)
將10 µL甘油標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液（1 mg / mL）加入990 µL 1X PBS緩沖液中，以生成10 µg / mL標(biāo)準(zhǔn)溶液（G7）。 然后進(jìn)行1：2的系列稀釋，以獲得系列稀釋的甘油標(biāo)準(zhǔn)品（G6-G1）。

3.工作溶液

3.1 將5 mL測定緩沖液（組分C）添加到一瓶酶混合物（組分B）中，并充分混合。

3.2 將25 µL Amplite HRP底物原液添加到組分B + C的瓶子中，并充分混合以制成甘油工作溶液（組分A + B + C）。 注意：此甘油工作溶液足以用于一個(gè)96孔板。 它不穩(wěn)定，請及時(shí)使用。 注意：可以將未使用的B + C組分分成一次性使用的等分試樣，并保存在-20°C下。