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Amplite 比色法生物*定量試劑盒是美國(guó)AAT Bioquest生產(chǎn)的Amplite系列試劑盒，抗*蛋白/鏈霉抗*蛋白 - *相互作用是蛋白質(zhì)與其配體之間的已知非共價(jià)生物相互作用（Kd = 10-15M-1）。一種抗*蛋白結(jié)合四種*。*與抗*蛋白/鏈霉抗*蛋白之間的鍵形成非常迅速，一旦形成，不受pH，有機(jī)溶劑和其他變性劑的影響?？?蛋白和鏈霉抗*蛋白都具有基本上不可逆的*結(jié)合特性，因?yàn)榻Y(jié)合的*只能通過(guò)使蛋白質(zhì)的亞基變性來(lái)釋放。*及其衍生物與各種抗*蛋白的緊密和特異性結(jié)合已被廣泛研究用于許多生物學(xué)應(yīng)用。 Amplite™比色*定量試劑盒提供了一種方便的方法，用于估算* - 蛋白質(zhì)結(jié)合物中*與蛋白質(zhì)的摩爾比或用于定量溶液中*濃度。該測(cè)定使用HABA（4'-羥基偶氮苯-2-羧酸），這種試劑在與抗*蛋白結(jié)合時(shí)顯示出顯著的光譜變化。*容易從HABA /抗*蛋白復(fù)合物中置換HABA，導(dǎo)致500nm處的吸收減少。該試劑盒于測(cè)定2至16μM范圍內(nèi)的*濃度?？梢砸员壬蠡蛭⒖装逍问竭M(jìn)行測(cè)定。百螢生物是AAT Bioquest的中國(guó)代理商，為您提供的Amplite 比色法生物*定量試劑盒。

實(shí)驗(yàn)方案

樣品實(shí)驗(yàn)方案

簡(jiǎn)要概述

1.準(zhǔn)備HABA /抗生物S蛋白測(cè)定溶液（180μL）
2.添加測(cè)試樣品（20μL）
3.在室溫下孵育5分鐘
4.檢測(cè)500nm處的吸光度

溶液配制

1.儲(chǔ)備溶液配制

所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。
Avidin原液（100X）：
向Avidin（組分A）中加入400μLDdH2O，并充分混合。注意：未使用的100X Avidin原液應(yīng)分成一次性使用的等分試樣并儲(chǔ)存在-20℃。

2.工作溶液配制

HABA /抗生物S蛋白測(cè)定溶液：
將200μL抗生物S蛋白原液（100X）加入20 mL HABA分析緩沖液（組分B）中，并充分混合。注意：HABA /抗生物S蛋白測(cè)定混合物的未使用部分可能在4°C儲(chǔ)存至一周。